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* 防止乙醇挥发和色素氧化 盛放滤液的试管管口加棉塞 (5) 防止乙醇挥发,充分溶解色素 迅速、充分研磨 (4) 研磨充分和保护色素 加少量SiO2和CaCO3 (3) 溶解色素 研磨时加95%乙醇 (2) 使滤液中色素含量高 选新鲜绿色的叶片 (1) 提取色素 操作目的 注意事项 过程 防止色素直接溶解到层析液中 滤液细线不触及层析液 (4) 使分离出的色素带清晰分明 滤液细线干燥后再画一两次 (3) 使分离出的色素带平整不重叠 滤液细线要直、细、匀 (2) 使层析液在滤纸上快速扩散 滤纸预先干燥处理 (1) 分离色素 操作目的 注意事项 过程 如“强化训练”T5 探究色素对不同光波吸收能力的强弱 3 如“强化训练”T7 探究温度、pH对叶绿素稳定性的影响 2 如[典例] 利用色素提取和分离的原理探究叶片变黄的原因 1 光合色素的提取和分离 纸层析法的主要步骤包括制样、制备滤纸条、画滤液细线和层析分离 适用于溶液 中物质的分离 纸层析法 光合色素的提取和分离 研磨时要先将生物材料切碎,然后加入摩擦剂(常用二氧化硅)、提取液及其他必要物质,充分研磨之后,往往要进行过滤,以除去渣滓 适用于从生物组织中提取物质,如酶、色素等 研磨过滤 涉及实验 处理方法或原理 适用范围 方法 观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 水培法,让洋葱、蒜等长出根 适用于用根尖做实验材料的实验 根尖培养技术 光合作用产物——氧气中氧的来源,二氧化碳形成葡萄糖的途径等 用同位素标记某种特定元素或化合物 用于物质代谢及其他实验中以了解物质来源或去向,或区分事情结果是由于此还是彼的原因 同位素示踪技术 探究温度对 酶活性的影响 一般用水浴锅或恒温箱 适用于有酶参与的生化反应 恒温技术 观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 将洋葱根尖放入盛有质量分数为10%盐酸的玻璃皿中,室温下解离 用于破坏细胞壁,分散植物细胞,制作临时装片 解离技术 涉及实验 处理方法或原理 适用范围 方法 * 重点实验课(五) 光合色素的提取与分离
第三单元 细胞的代谢
一、实验原理
(1)提取:叶绿体中的色素溶于有机溶剂而不溶于水,可用95%乙醇等有机溶剂提取色素。
(2)分离:各种色素在层析液中溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快,反之则慢,从而使各种色素相互分离。
二、操作流程
提取色素:称量5 g绿色叶片并剪碎
加入少量SiO2、CaCO3和10 mL95%乙醇
研钵
→
研磨
过滤
―→
收集到试管内并塞紧管口
―→
制滤纸条
①将干燥的滤纸剪成长6 cm,宽1 cm的纸条,剪去一, 端两个角
②在距离剪角一端1 cm处用铅笔画线
画滤液线
①用毛细吸管吸收少量滤液,沿铅笔线均匀地画一, 条直的滤液细线
②干燥后,重复画2~3次
色素分离
①倒入试管3 mL层析液?层析液高度不超过滤液细线?
②将滤纸条尖端朝下略微斜靠试管内壁,轻轻插入层析液,
③用棉塞塞紧试管口
观察结果
1.注意事项及原因分析
2.光合色素提取分离异常现象分析
(1)收集到的滤液绿色过浅的原因分析:
①未加石英砂(二氧化硅), 研磨不充分。
②使用放置数天的菠菜叶,滤液色素(叶绿素)太少。
③一次加入大量的95%乙醇,提取浓度太低(正确做法:分次加入少量95%乙醇提取色素)。
④未加碳酸钙或加入过少,色素分子被破坏。
(2)滤纸条色素带重叠:
①滤液细线不直。
②滤液细线过粗。
(3)滤纸条看不见色素带:
①忘记画滤液细线。
②滤液细线接触到层析液,且时间较长,色素全部溶解到层析液中。
高考对本实验的常规考查主要涉及实验原理、操作过程及结果分析等,除此之外,还可能从以下角度进行考查:
[典例] 下列是某实验小组在完成光合色素提取与分离实验时所遇到的有关问题,分析回答:
(1)剪碎5 g新鲜浓绿的菠菜叶片放在研钵中,加入SiO2后,经迅速研磨成糊状,发现糊状的研磨液呈现浅绿色,其原因是没有加入___________________,使得________________。
(2)甲同学在实验过程中将画有滤液细线的滤纸条(已重复几次画线)插入层析液,几分钟后取出观察,发现滤纸条上无色素分带现象,而用同一滤液做实验的乙同学的滤纸条上却色素分带明显。甲同学实验失败的原因可能是_______________________。
(3)若选用在缺Mg的营养液中长期培养的玉米叶片作实验材料,层析后滤纸条上只出现了两条色素带,其原因是________________________________________________________________。
(4)实验结束几天后,甲、乙两同学发现部分预留叶片已变黄。甲同学认为这是由于叶片中叶绿素降解所造成的,乙同学则认为是类胡萝卜素含量增加所致。根据所学知识,设计实验来判断
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