重组11分析报告.pptVIP

Xiaofang Xie College of Life Science Fujian Agriculture and Forestry University E-mail:xxf317@ 遗传重组的概念 遗传重组是指通过染色体断裂和重接，使染色体遗传组成发生改变的事件或过程。主要有以下几种类型： 同源重组： 发生于 DNA 同源区段之间的遗传重组，是最主要的类型，如真核生物中非姊妹染色体间的交换。 位点专一重组（非同源重组）：发生于两个非同源或同源性很低的DNA 区段之间，它们在特定位点（长约十几个核苷酸）处联会，并在特定的酶的催化下，在该位点发生 DNA 的断裂和重接。 转座：小片段 DNA （转座子）在基因组 DNA 中的位置发生移动，是一种特殊的遗传重组。 同源重组的Holliday 模型 1964年，由伦敦国家医学研究所 Robert Holliday 提出，用于解释真菌子囊孢子减数分裂中遗传重组的结果，特别是 “遗传转变” 现象。后来其他生物中的研究也支持了该模型的中心思想。 特别令人信服的是，用电镜观察到了重组过程中 X 形的 Holliday 连接体结构。 Holliday模型图解 重组始于同源染色体联会。首先在两条非姐妹染色单体的相对位置上产生切刻，然后彼此间发生DNA单链侵入（即交换），形成交叉。交叉点通过分枝迁移而移动，使DNA杂合双链区域扩大。然后发生第二次切刻。若切刻发生在两交叉链上，则重接后，两非姐妹染色单体间未发生重组，只是存在一段杂合双链；若切刻发生在非交叉链上，则重接后，两非姐妹染色单体间发生重组，并且也存在一段杂合双链。 Holliday连接体 单链侵入并重接后，两非姐妹染色单体之间即表现出Holliday连接体构象。连接体的解开需要两条单链的切刻（即第二次切刻）。可以有两种切刻方式。若切刻发生在与第一次切刻相同的链上，则两非姐妹染色单体间不发生重组；若切刻发生在其它链上，则发生重组。 Holliday模型的改进 进一步研究发现，在重组起始阶段中，两个对应单链的切刻不必发生在同一位置，且 DNA 双链断裂或单链切刻均可参与遗传重组。鉴于这些实验观察结果，对 Holliday 模型进行了改进。 已提出了两种改进模型： Meselson-Radding 模型 双链断裂模型 Meselson-Radding 模型 该模型由哈佛大学的 Matthew Meselson 和耶鲁大学的 Charles Radding 提出，它假设重组由一个 DNA 单链的切刻开始。但同样也假设单链侵入、分枝迁移、Holliday连接体等机制。 双链断裂模型 该模型由 Jack Szostak 等提出，认为重组起始于一条染色单体的 DNA 双链的断裂，核酸酶的作用会使 DNA 单链产生断口，断口必须修复。其它机制与Holliday模型相同。 位点特异重组 位点特异重组的一个典型例子是? 噬菌体在溶源周期，将基因组整合到大肠杆菌的基因组上。整合位点称为附着位点，在?DNA 和大肠杆菌DNA 上序列相同，分别记为attP 和 attB。 多个由?DNA 编码的整合酶分子结合到附着位点上，使?DNA 和大肠杆菌DNA 相互靠近，并发挥内切酶作用产生粘性末端。两DNA 单链交换重接，则完成整合。 当原噬菌体被重新激活时，则仍由整合酶催化反过程，同时还需切除酶（也由?DNA 编码）协助，使 ?DNA 从大肠杆菌 DNA 上切除下来。 染色体重排 近源物种中的染色体重排P303？ 转座和反转录转座 转座是指基因组中某一 DNA 片段将其自身或其拷贝转插到染色体上的另一位置的过程或现象。这样的片段称为转座元件（transposable element，TE）。转座包括两种类型： 简单转座（保守转座）：TE 从原来位点转移到新的位点。 复制转座：TE复制出新拷贝插入另一位点，原来位点上的TE保持不变。 反转录转座是指反转录转座元件（retroelement, RE）以 RNA 为介导的转座现象。RE形成一个拷贝，插入到另一位点，而原来位点上的RE保持不变。 反转录病毒 反转录病毒（retrovirus）是以RNA为基因组的病毒，能够侵染许多脊椎动物。 侵入细胞后，其RNA基因组可反转录成cDNA，并整合到宿主基因组中。 利用整合的DNA转录成RNA，并合成有关的病毒外壳蛋白，即可包装成新的病毒个体。 内源反转录病毒 内源反转录病毒（endogenous retrovirus, ERV）是指整合到脊椎动物基因组中的反转录病毒的基因组序列。有的可能还有活性，在适当的情况下会产生病毒。 但多数已失去编码产生新病毒的活性和转座能力，分散在宿主基因组中，人类基因组中约