双水相萃取分析报告.pptVIP

5.3 双水相萃取与应用 ? 双水相系统的形成： 两相均含有大量的水（高达80%以上）; 界面张力小，一般只有0.5-10-4mN/m; 萃取环境和条件温和; 生物相容性好，有时有稳定作用； 分配系数可控：聚合物修饰、相系统组成、操作条 件容易放大几百倍。 ? 发展历史： ? 发展历史： ? 缺点和不足： 双水相系统含较高浓度的水溶性聚合物和盐，会带到产物中，去除需要辅助处理方法； 成本较高； 选择性较低，分离纯化倍数低，一般只适用于粗分离。 系统熵的增加； 某些水溶性聚合物溶液与某些盐溶液混合，两者浓度达到一定值时，也会分为两相，形成聚合物-盐双水相系统。 高的产物回收、高生物活性回收、高的分离纯化倍数； 有利于大规模的应用：良好的工艺性能，系统黏度低，相分离快，达到相平衡时间短，工艺参数容易控制，工艺条件可调性范围大； 系统经济，成本低，无毒，适合大规模应用。 功能团配基亲和萃取: 离子分配萃取： 疏水分配萃取: 金属螯合亲和萃取: 染料亲和萃取: --问题与发展 聚合物的影响： 聚合物的影响: 盐浓度对K值的影响 PEG/盐系统的分配系数的调节 黏度： 两相密度差： 表面张力： 相间电势差： 相分离速度： 优点： 从微生物细胞萃取的酶： （续前） 多步双水相萃取分离纯化的酶： 双水相系统萃取酶的一般流程图 连续萃取流程图 大规模应用的可能性: 谢谢！ 随着温度的降低，分相的临界聚合物浓度减小; 在临界点附近，温度对双水相体系的形成更为敏感; 酶的双水相萃取可以在室温下进行. 使用PEG/(NH4)2SO4相系统从细菌中萃取荧光素酶时，温度对分配系数的影响不明显。 5.3.5 双水相萃取体系的影响因素 温度的影响 主要影响两相系统的形成： 5.3.5 双水相萃取体系的影响因素 双水相体系的性质 不仅影响相分离速度和流动特性，而且影响物质的传递和颗粒在两相中的分配； 主要决定于体系的组成和两相间组成的差别，在相图上体现在与结线的长度成线性关系； 一般加入不同比例的磷酸盐和氯化钠来控制相间电势 粗酶提取与回收；纯度要求不高的酶制剂的生产； 其他生物质如核酸、生长激素、病毒的分离和纯化； 生产一些纯度较高的酶制剂，如试剂用酶---使用具有高度选择性的亲和萃取技术。 5.3.6 双水相萃取体系的应用 （1）在生物工程领域的应用 可以应用于胞外酶萃取，也可应用于细胞破碎后的胞内酶萃取。 组成双水相系统的水溶性高分子聚合物大多数富含羟基，对酶有保护作用，酶在双水相系统中稳定性好，酶的活性收率较高，萃取过程可以在室温下进行； 双水相萃取的放大系数很大，放大后也可以获得较好地重复结果，这在其它的分离纯化技术上是很难做到的。 （1）在生物工程领域的应用 （1）在生物工程领域的应用 亮氨酸脱氢酶 球形牙孢杆菌 PEG/粗Dex 20 9.5 98 2.4 D-乳酸脱氢酶 乳杆菌 PEG/盐 20 4.8 95 1.5 L-2-羟基异癸酸脱氢酶 乳杆菌 PEG/盐 20 10 94 16 D-2-羟基异癸酸脱氢酶 干酪乳杆菌 PEG/盐 20 11 95 4.9 NAD-激酶 纤维二糖乳杆菌 PEG/盐 20 - 100 3.0 亮氨酸脱氢酶 蜡状牙孢杆菌 PEG/盐 20 15 98 1.3 富马酸脱氢酶 产氨短杆菌 PEG/盐 20 3.3 83 7.5 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 明串珠菌 PEG/盐 35 6.2 94 1.3 甲酸脱氢酶 假丝酵母 PEG/盐 33 4.9 90 2.0 甲酸脱氢酶 ? PEG/粗Dex 20 7.0 91 nd 甲醛脱氢酶 ? PEG/粗Dex 20 11 94 nd 异丙醇脱氢酶 ? PEG/盐 20 19 98 2.6 酰基芳香酰氨酶 荧光假单孢菌 PEG/盐 15 30 95 3.0 （1）在生物工程领域的应用 （1）在生物工程领域的应用 （2）在中草药有效成分分离中的应用 温度诱导双水相体系 蜕皮激素和羟基蜕皮激素 50%环氧乙烷和50%环氧丙烷的无规共聚物(UCON-HB-5100)-羟丙基淀粉(PES) 收率高达98.3% 甘草有效成分 乙醇-K2HPO4双水相体系 草药中的黄芩苷和黄芩素 PEG6000-K2HPO4双水相体系 备注 分离物质 双水相体系 （3）在贵金属分离中的应用 从碱性氰化液中萃取分离金 PEG-硫酸钠双水相体系 Ti(Ⅳ)和Zr(Ⅳ) PEG2000-硫酸铵-偶氮胂（Ⅲ）双水相体系 备注 分离物质 双水相体系 双水相萃取，可采用批式的一步萃取法或多步萃取法。最简单的是批式一步萃取。 5.3.7 批式萃取 如采用PEG/盐的浓溶液处理细胞破碎物或发酵液。 批式