支原体指导书重点解读.doc

文件名称 微生物标准染色方法 版本 文件编号 状态 编写日期 编写 审核日期 审核 发布日期 签字 【检验目的】检验样本中是否含有抗酸杆菌，为临床提供诊断依据。 【原理】结核菌、麻疯杆菌、耻垢菌等抗酸性菌，因其菌体表面有一层脂或脂质之皮膜不易着色，但一经着色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脱色。利用这特性并以增强的染色液予染色，然后再以酸及乙醇加以处理，使其脱色后再对比染色，此时抗酸性菌仍是固定着最初色素的颜色（红色）。 【试剂】试剂名称：结核菌染色液 试剂生产厂家：珠海贝索生物技术有限公司 　　包装规格：250ml*4 　　试剂组成：1、石碳酸复红溶液 　　　　　　　2、酸性酒精溶液 　　　　　　　3、亚甲基蓝溶液 储存条件及有效期：原包装未开封染色液的有效期为24个月，在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。 【标本要求】（1）标本类型：病人的痰、穿刺关节液、腹水、胸积液、组织、脑脊液、分泌物、尿液等。 （2）标本采集：见标本采集手册（一般须得深咳痰，其它无特殊要求。） （3）标本储存和运输：可室温保存、室温运送。病人标本须密封运送以避免污染环境。 【检验方法】1、痰液标本取干酪样、脓样或可疑部分约0.05毫升，其他体液标本取离心后沉淀0.05毫升，于玻片正面均匀涂抹成10*20毫米卵圆形菌膜，自然干燥。染色前加热固定。 2、放置在染色架上，玻片间距保持10毫米以上距离；火焰固定。 3、滴加石碳酸复红溶液盖满玻片，染色10分钟或更久。 4、流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去染色液，沥去标本上剩余的水。 5、自菌膜上端外缘滴加酸性酒精溶液盖满玻片，脱色1-2分钟；如有必要，需流水洗去酸性酒精溶液后，再次脱色至菌膜无可视红色为止。 6、流水自玻片一端轻缓冲洗10-20秒，冲去酸性酒精溶液，沥去玻片上剩余的水。 7、滴加亚甲基蓝溶液，染色30秒钟。 8、流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去亚甲基蓝溶液，然后沥去标本上剩余的水，待玻片干燥后镜检。 9、一张染色合格的玻片，菌膜肉眼观察为亮蓝色，无红色斑块。 【检验结果的解释】在淡蓝色背景下，抗酸性菌呈红色，其他细菌及细胞呈蓝色。结核分枝杆菌多数为杆状、稍弯曲；菌体宽度0.3-0.6微米；菌体长度不一，在0.5-8微米之间，多数在1.5-3.5微米；少数菌体较长者可呈螺旋状；染色良好的结核分枝杆菌菌体内，能够发现着色较深的易染颗粒。含结核分枝杆菌较多的新鲜标本经染色油镜观察，既能发现单个存在的细菌，也能看到聚集成簇或分枝状排列的细菌。 【结果报告】 镜下抗酸杆菌计数 分级报告标准 连续300个视野未见抗酸杆菌 抗酸杆菌阴性（-） 1-8条/300视野 报告抗酸杆菌数 3-9条/100视野 报告抗酸杆菌（1+） 1-9条/ 10视野 报告抗酸杆菌（2+） 1-9条/每视野 报告抗酸杆菌（3+） ≥10条/每视野 报告抗酸杆菌（4+） 【检验方法的局限性】仅限于抗酸性菌的染色，麻风菌对结果有干扰。 【临床意义】结核分枝杆菌不产生内毒素和外毒素，其毒力主要是在机体中细胞内、外生长与大量繁殖的能力，细菌成分与其代谢产物引起免疫反应（Ⅳ型）导致一系列组织学上的意义。 文件名称 沙眼衣原体检测标准程序 版本 A/O 文件编号 状态 受控 编写日期 编写 审核日期 审核 发布日期 签字 1.【原理】衣原体按其特性分为三类：沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体和肺炎衣原体。沙眼衣原体有15个已知的血清型，其中12个血清型与沙眼和生殖道的感染有关； 另外3个则与性病性淋巴肉芽肿的发生有关。 沙眼衣原体抗原检测试剂盒（胶体金法）系用抗衣原体脂多糖单克隆抗体 和羊抗体IgG多克隆抗体分别固定于固相硝酸纤维素膜，并和胶体金标记的另一 抗衣原体脂多糖单克隆抗体及其他试剂盒原料制成，应用胶体金免疫层析技术 采用双抗体夹心的形式建立的衣原体检测方法，用于女性宫颈和男性尿道中沙 眼衣原体抗原的检测。 2.【试剂】 （1）来源：上海凯创生物技术有限公司。 通用名：沙眼衣原体抗原检测试剂盒。 商品名：沙眼衣原体抗原检测试剂盒。 （2）试剂盒组成 沙眼衣原体抗原快速检测试剂卡：20份（内含一条包被有抗衣原体脂多糖单克隆抗体-I、抗衣原体脂多糖单克隆抗体-Ⅱ和羊抗鼠IgG试纸条。单人份铝 箔袋包装）。 溶液A1瓶（含