植物细胞和组织培养实验教学大纲重点解读.doc

植物细胞和组织培养实验 Plant Cell and Tissue Culture Experiment 一、教学目的 通过本课程的学习，使学生能够了解国内外细胞培养的最新动态和研究进展有关概念、基本原理、操作程序和关键技术 第二章 实验室设备和无菌操作技术（2学时） 通过本章学习，使学生了解植物组织培养实验室的设计，所需仪器、设备、药品的购置、选择、清洗、消毒及无菌操作技术等。掌握常用设备及工具的使用方法；主要的灭菌技术及无菌操作规程。树立学生的无菌操作概念，让学生明白植物组织培养技术要求“细心、耐心、恒心”三心合一。 1．实验室设计：通用实验室；接种室；培养室；洗涤室。 2．常用设备和器材：高压无菌锅；接种工具；培养设备；化学实验及分析设备；培养物细胞学观察设备。 3．玻璃器皿的选择与清洗：玻璃器皿的选择；玻璃器皿的清洗 4．无菌操作技术：主要的灭菌技术及其应用范围；无菌操作规程。 第三章 培养基及其配制（2学时） 通过本章学习，使学生了解培养基的成分、种类、配制方法及常用的培养基配方及特点。理解培养基中不同成份的作用原理。掌握植物生长调节剂的种类、作用、配制及使用要点；母液配制及保存方法；培养基配制程序。 1．培养基的成分：无机盐；炭源和能源；维生素类；氨基酸及有机附加物；植物生长调节物质。 2．培养基的配制方法：水和药品的选用；母液的配制和保存；培养基配制程序。 3．常用培养基配方及其特点：几种常用的培养基配方；几种常用培养基的特点。 第四章 外植体的选择，接种与培养（2学时） 通过本章学习，使学生了解影响外植体选择的各种因素及外植体接种的一般程序。掌握常用灭菌剂种类、外植体的灭菌及接种方法；外植体的培养方法及培养条件。 1．影响外植体选择的因素：外植体的部位：取材季节；器官的生理状态和发育年龄；外植体的大小。 2．外植体的灭菌与接种方法：常用灭菌剂种类；外植体的灭菌方法；接种方法；接种程序。 3．外植体的培养：培养方法；培养条件。 第五章 愈伤组织的培养（2学时） 通过本章学习，使学生了解愈伤组织诱导培养、继代培养和形态发生培养的过程及其影响因素。掌握愈伤组织的形成过程及质量分类；确定继代培养时间的方法；器官发生途径和体细胞胚胎发生途径的含义和特点。 1．愈伤组织的诱导和分化过程：愈伤组织、脱分化、再分化的概念；愈伤组织的形成过程；影响愈伤组织的诱导的因素。 2．愈伤组织的继代培养：继代培养的意义；继代培养时间的确定；愈伤组织质量的分类。 3．愈伤组织的形态发生途径：器官发生途径；体细胞胚胎的发生途径；影响愈伤组织形态发生的因素。 第章 植物细胞培养 通过本章学习，了解悬浮细胞培养、单细胞培养的概念及基本的培养方法；掌握悬浮细胞培养培养基的设计及调整；分离单细胞的原理和方法以及培养单细胞的特殊条件。 1． 悬浮细胞的培养技术：悬浮细胞培养的概念；悬浮细胞培养培养基的设计及调整；续代培养与条件培养技术。 2． 单细胞培养技术：单细胞培养的概念；分离单细胞的原理和方法；培养单细胞的特殊条件；培养单细常用方法：平板培养、微室培养、看护培养。 第七章 植物组织培养中常见问题及解决办法（学时） 1．组培污染及防治：微生物及其污染症状；预防办法；解决办法。 2．材料褐化及其防止：材料褐化及其症状；预防办法；解决办法。 3．玻璃化问题及其防止：玻璃化及其症状；预防办法；解决办法。 三、课程教学的基本要求 本课程的教学环节包括：课堂讲授、实验。通过本课程各个教学环节的教学，重点培养学生的自学能力、动手能力、分析问题、解决问题的能力。 （一）课堂讲授 主要教学方法： 组织培养是一门技术性、理论性较强的课程，在传统的教学基础上，把部分内容引入多媒体教学手段，让学生可以看到具体的基本仪器、各技术环节的操作过程，然后再结合课堂讲授与实物结合，以及参观实验室进行实地教学等方法，使学生有较为直观的印象和学习效果。 （二）实验环节 通过实验课学习，使学生理解和掌握植物细胞与组织培养技术的基本原理和基本实验方法，锻炼学生操作技术的规范化、熟练化及培养学生解决实验中出现问题的能力，同时着重培养学生对实验结果的客观，细致分析与总结，然后编写出完整的实验报告，为以后从事生物学研究工作打下坚实基础。 实验内容及要求见“实验部分大纲”。 （三）考试环节 学生成绩评定：平时成绩40%+期末考试60% 平时成绩包括：学习态度、课程论文、实验等。 期末考试主要采用笔试形式，题型主要分为：名词解释题、判断题、选择题、简答题、论述题。 四、参考教材 [1] 《植物细胞与组织培养实验指导》，于翠梅主编，校内教材，2005 [2] 《植物组织培养教程》，李浚明主编，中国农业大学出版社，1996 [3] 《植物细胞工程原理与技术》，周维燕主编，中国农业大学