兔血液凝固的影响因素与抗凝血药的作用观察.pptVIP

兔血液凝固的影响因素与抗凝血药的作用观察 实验目的 相关知识（重点） 材料与方法（采血法-难点） 观察项目 结果与讨论 实验目的 1、 通过实验了解血液凝固的基本过 程及了解不同因素对血液凝固的影响。 2、观察柠檬酸钠的体外抗凝血作用， 并分析其作用机制。 一、血液凝固的基本过程 材料与方法 （一）实验材料 实验动物：家兔 实验仪器：秒表，试管，试管架，家兔固定架，注射器，手术器材。 实验药品和试剂：生理盐水，冰块，肺组织浸液，液体石蜡，柠檬酸钠，肝素（8U），少量棉花。 （二）实验方法 1、麻醉固定：用 200g/L 的氨基甲酸乙酯按 5ml/kg 体重剂量给家兔腹腔注射麻醉，将家兔仰卧位固定于固定架上。 * * * * * * 人体机能实验中心 相关知识 瀑布学说 （凝血酶原激酶） 图1 内源性与外源性凝血过程示意图 脑或肺组织 中含量较高 柠檬酸钠 （减少游离的 钙离子） 二、体内抗凝系统 （一）血管内皮具有抗凝作用 ①血管内壁光滑，防止凝血因子和血小板与内皮下的成分发生接触，无Ⅻ→Ⅻa的过程。 ②血管内皮释放前列环素（PGI2），防止血小板聚集和释放。 （二）体内生理性抗凝物质的抗凝作用 ①抗凝血酶（以抗凝血酶Ⅲ为主，占总活性50%） 作用：与凝血酶结合（1：1）使凝血酶失活。 ②肝素：酸性粘多糖，由肥大细胞产生。 作用：使抗凝血酶Ⅲ与凝血酶的亲和力增大。抑制凝血酶原激活、抑制血小板黏附聚集和释放。激活脂酶，有利于乳糜微粒的消除，有助于防止与血脂有关的血栓形成。 ③其他物质：如蛋白质 C、组织因子途径抑制物等。 （三）血流的稀释作用及单核巨噬细胞的吞噬作用有助于防止凝血过程的扩散。 （四）凝血因子的激活局限于血管的受损部位。 三、纤维蛋白溶解系统 图2 纤维蛋白溶解系统示意图 四、纤溶与血凝之间的动态平衡及临床意义 正常情况：如果血管受损，首先发生血凝块或血栓以达到止血。后来由于纤溶系统的作用，则血凝块或血栓可以溶解、液化，使血管再通畅，这样两方面保持着动态平衡。 异常情况： 1、纤溶过弱，就可能出现血栓形成和纤维蛋白沉积过多现象，出现广泛小血管形成微血栓。 如：心肌梗塞和动脉硬化等疾病的发生，可能与纤维蛋白沉积过多有一定的关系。 试用提高纤溶作用的药物来防止血栓形成和心肌梗塞。 2、纤溶过强或血凝障碍，都会影响止血功能，使机体出现出血和渗血现象。 如：弥散性血管内凝血（DIC），是某些致病因子作用下，凝血因子或血小板被激活，大量可溶性促凝物质入血，从而引起一个以凝血功能障碍为主要特征的病理过程。 DIC 若不治疗，则以凝血始，以出血终，临床表现主要为出血、休克、微血管病性溶血性贫血和器官功能障碍 2、手术操作：切开颈部皮肤，分离出左颈总动脉，结扎左颈总动脉远心段， 用止血夹夹住近心段，进行左颈总动脉插管。 3、试管处理：1号试管滴加生理盐水0.1ml，2号试管作为正常对照组置于室温不做任何处理，3号试管置于冰块中，4号试管滴加肺组织浸液0.1ml，5号试管放入少量棉花，6号试管均匀涂液体石蜡，7号滴加柠檬酸钠溶液0.1ml，8号试管滴加肝素0.1ml。 颈总动脉插管 远心端结扎 近心端用动脉夹夹闭 动脉套管上的固定圈 剪V型切口 远心端结扎 近心端用动脉夹夹闭 返回 （一）实验观察 1、放开动脉夹，向1～8试管每管加入血液1ml，立即用秒表计时，每隔15s将试管倾斜一次，观察血液是否凝固，至血液成为凝胶状，记下所经历时间。 2、将多余的血盛于两个小烧杯中，并不断用竹签搅动其中一烧杯中的血液直至纤维蛋白形成。置于一段时间后，观察比较两烧杯的血液凝固状态。 （二）实验记录：本次实验共包括8组，其结果填入下表。 观察项目 表1 血液凝固的影响因素与体外抗凝作用 试管 编号 影响因素 凝血时间(s) 每 管 加 血 1ml 1 加生理盐水 　 2 室温230C 3 置于冰槽中 4 加肺组织浸液 5 少许棉花 6 石蜡油涂管壁 7 加柠檬酸钠 8 加肝素 　 小烧杯放血10ml 放血10ml于烧杯中不断用竹签搅拌，2-3min后用水冲竹签后观察之 小烧杯放血10ml 不经任何处理（对照） 结果与讨论 1). 取干净的小试管，准备各种不同的实验条件，然后加入血液1ml，经观察凝血时间最短的是 A. 空白管 B. 试管内放棉花少许 C. 试管置于有冰块的小烧杯中 D. 试管保温于37°C水浴糟中