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病毒感染单位的测定有哪些方法?
空斑试验、终点稀释法、荧光-斑点试验、转化实验
空斑试验:空斑是细胞病变的一种特殊表现形式。一个空斑可能由一个以上病毒颗粒感染所致,因此可将获得的单个空斑制作悬液,梯度稀释后再做空斑,最终可获得只含一个病毒颗粒及其子代的空斑,这就是病毒克隆。根据样本的稀释度和空斑数,计算每毫升空斑形成单位(PFU)。空斑试验是纯化和滴定病毒的一个重要手段,只是并非所有病毒或毒株都能形成空斑。
终点稀释法:用于测定几乎所有种类的病毒滴度,包括某些不能形成空斑的病毒,并可用以确定病毒对动物的毒力或毒价。
荧光-斑点试验:是空斑试验的一种改良方法,用于测定细胞培养时不会引致CPE的病毒的滴度。
转化实验:用于测定某些不形成空斑的逆转病毒
直接检测病毒颗粒的技术有哪些?
电子显微镜(EM)简称电镜,是观察病毒颗粒最直观的方法。
直接负染,或超薄切片后在做负染观察。前者适用于观察病毒的表面结构,后者可观察细胞内的病毒结构。
免疫电镜(IEM)应用病毒的特异抗体的电镜技术。
血凝试验,红细胞凝集
具有血凝特性的病毒鉴定方法。检测抗原核抗体的方法
血凝抑制试验:血凝活性病毒的抗体可阻断病毒与红细胞的结合,利用血凝抑制试验可以检测和鉴定具有血凝特性的病毒。
病毒中和试验:病毒中的一些蛋白质抗原或抗原表位的抗体与病毒结合后可以中和病毒的感染性。在细胞培养,鸡胚或动物上进行。检测病毒感染动物血清中的抗体。
病毒蛋白检测:病毒抗体可以用于检测感染细胞或组织中的病毒蛋白。可采用免疫染色技术如免疫荧光抗体技术、免疫酶染色技术,主要有直接免疫染色和间接免疫染色方法。
补体结合试验:可以用于检测动物血清中的病毒抗体。病毒抗原与抗体的相互反应可以引起补体结合,最终可导致膜溶解。
免疫沉淀:免疫沉淀技术是基于病毒特异性抗体与感染细胞或组织的可溶性提取物中的病毒蛋白的相互作用。
免疫转印:基于抗体与固定在滤膜上的病毒蛋白的相互作用。
酶联免疫吸附试验:样本病毒的检测和动物血清中病毒特异性抗体的检测。
检测病毒核酸常用方法(技术)。
聚合酶链式反应技术
核酸杂交技术,用于细胞、组织中病毒基因组或转录产物的定位测定,称为原位杂交。
DNA芯片技术
简要比较非洲猪瘟病毒和猪瘟病毒的区别。
①分类地位:非洲猪瘟病毒是非洲猪瘟病毒科;猪瘟病是黄病毒科,瘟病毒属
②基因组成:非洲猪瘟病毒是单分子线状DNA;猪瘟病毒是单股正链DNA
③是否虫媒:非洲猪瘟病毒是;猪瘟病毒不是
④临床症状:非洲猪瘟病毒:急性高热,全身出血,病程短,死亡高;猪瘟病毒:高热导致猪繁殖障碍,厌食,萎靡性结膜炎
⑤增殖:非洲猪瘟病毒:细胞浆内;猪瘟病毒:肾细胞系统
⑥致病机理:非洲猪瘟病毒是由呼吸道入侵;猪瘟病毒是通过采食入侵,扁桃体是最现定居器官。
非洲猪瘟病毒形态、基因组结构及传播方式的特点。
病毒颗粒有囊膜,核衣壳20面体对称,基因组由单分子线状双股DNA组成。临床表现为:急性高热,全身出血,肾脏有针尖大小出血点病程短,死亡率高。通过接触,呼吸道传播。实验室诊断可用免疫方法,ELISA,淋巴杨繁殖,不产生抗体,没有特效疫苗,持续感染。
唯一已知的的核酸为DNA的虫媒病毒。
非洲猪瘟
疱疹病毒目的分类与共同特点;该目中有哪些是OIE规定通报疫病的病原。
疱疹病毒目分为三个科,疱疹病毒科,异样疱疹病毒科和贝类疱疹病毒科,形态相似,都有持续感染的特点。
疱疹病毒科分为三个亚科,甲型、乙型和丙型疱疹病毒亚科,牛传染性鼻气管炎病毒、伪狂犬病病毒、禽传染性喉气管炎病毒、鸭瘟病毒等有重要的致病作用,马立克病病毒还可导致肿瘤异样疱疹病毒科包括鱼类和两栖类的疱疹病毒,其中锦鲤疱疹病毒所致疾病是OIE规定的通报疫病。
OIE规定通报疫病的病原:牛传染性鼻气管炎、伪狂犬病、禽传染性喉气管炎、马鼻肺炎、牡蛎疱疹病毒
鸡马立克病病毒的致病特点,预防用疫苗,免疫鸡日龄。
①马立克病病毒疱疹病毒科,疱疹病毒甲亚科;
②三个血清型:病毒毒系1型、2型微费非致瘤毒株,3型为火鸡疱疹病毒,可致火鸡产卵下降,对鸡无致病性;
③4周龄雏鸡即可感染发病,2~5月龄高发,死亡率可达80%;
④可为神经淋巴瘤病,出现麻痹等症状,羽囊角化层的上皮细胞含有病毒,是污染源
诊断:琼脂扩散;免疫荧光实验;分离病毒:接种4日龄鸡胚卵黄囊或尿囊膜
疫苗:HVT(HVT免疫;1日龄鸡接种全进全出;抗病育种)
简述细小病毒科与圆环病毒科异同;简述细小病毒对犬、猫、猪治病的共性及各自特点;OIE通报疫病病原。
一、 细小病毒科与圆环病毒科异同
①特点:细小病毒科,病毒颗粒无囊膜,20面对称体,衣壳由60个VP2及少量VP1蛋白质分子组成,病毒在细胞核内复制,抗原性好,抵抗力强,不同种之间有交叉反映;圆环病毒科:环状DNA,病毒
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