结核感染介绍.ppt

γ干扰素干扰素释放试验（IGRAs) 原理 IGRAs是检测用结核分枝杆菌（MTB）特异性抗原刺激T细胞产生γ干扰素情况，以判断机体是否存在MTB的感染 MTB已感染的机体受MTB抗原刺激致敏T细胞，当再次遇到同类抗原时可产生γ干扰素，通过检测效应T细胞产生γ干扰素的能力,来诊断是否已感染MTB 方法 采用酶联免疫吸附试验（ELISA)检测全血中T细胞受到MTB特异抗原刺激后释放γ干扰素的水平，称为结核感染T细胞免疫检测 采用酶联免疫斑点技术（ELISPOT)测定外周血单个核细胞中，在MTB特异性抗原刺激下释放γ干扰素的效应T细胞的数量，称为结核感染T细胞检测 二者采用的特异性抗原为MTB的RDI区基因编码抗原多肽，有早期分泌原靶（ESAT-6)和培养滤液蛋白（CFP-10)抗原或抗原多肽 特点 所用特异性抗原ESAT-6和CFP-10主要存在于MTB复合群，在卡介苗和大多数NTM中缺失，因此特异度高于PPD 由于ELISPOT技术是从单细胞水平进行检测，可及时捕获细胞分泌的细胞因子，故敏感性较高，但实际使用中发现IGRAs在某些人群中并未显示敏感性高于PPD IGRAs对实验技术和条件要求较高，样本检测时限短，难以实现高通量，而且价格贵，限制了广泛应用 IGRAs在我国结核感染诊断中应用的意见 肺结核患者密切接触者中结核感染的诊断与PPD比较有更好的特异度，但很多学者倾向在PPD阳性时再用IGRAs确认 不宜采用IGRAs对大范围健康人群进行结核感染筛查 在排除儿童结核感染时，可先用PPD，对PPD阳性再用IGRAs帮助诊断。不建议常规以IGRAs替代PPD对儿童结核病进行辅助诊断 IGRAs特别是细胞检测，受CD4 T细胞数量的影响小于PPD，在检测程序上消除了淋巴细胞数量减少对结果的影响。因此对HIV阳性人群，IGRAs阴性能较好地排除MTB感染 自身免疫性疾病和器官移植患者在应用免疫抑制剂前，可用IGRAS或联合使用PPD筛查结核感染 对IGRAs应用的评价 IGRAs可用于诊断MTB感染，但不能区分活动性结核病和MTB感染，也不能预测MTB感染发展为活动结核病的风险 阴性对排除结核感染有帮助，对疑似结核病的诊断和鉴别诊断在常规诊断依据基础上有辅助作用 IGRAs诊断MTB感染不受卡介苗接种和多类NTM感染的影响。由于技术要求和价格等因素尚不宜用于流行病学筛查，也不推荐替代PPD对大范围人群的筛查 对HIV阳性人群筛查MTB感染的敏感性可能优于PPD 由于目前对MTB感染的诊断缺乏金标准，尚难以客观评价IGRAs对MTB感染的诊断作用 改进结核感染诊断技术目标 增强敏感性和特异性，改善可及性 开发简单、准确、快速检测技术，当天获得结果 准确诊断潜伏感染，确定发病风险 快速确认耐药性 结 语 人体感染结核分枝杆菌后，一部分结核菌通过改变代谢途径及自身特点而适应不利生长环境存活潜伏下来，在条件适宜时重新生长、繁殖，形成临床结核病。这是结核病长期不能控制和消除的重要原因之一，因此积极开展预防感染和对潜伏感染诊断的研究是控制和消除结核病的重要环节 谢谢 * 结核感染的诊断 屠德华 暴露（接触）结核菌 条件 与传染源个体间足以达到互相交谈程度的接触 或在有传染源存在，含有“微滴核”的不通风的限定空间内进行空气交换 影响暴露结核菌的因素 传染源病例数，发生率的水平 传染期：受早期发现，早期治疗和合理治疗的影响 其他因素：包括人口密度、家庭生活水平、居住状况、气候差别、通风情况。传染源个人习惯、行为、年龄和社会角色及社会参与的方式等常决定以同代间还是上、下代或隔代传播为主 暴露（接触）结核菌结果 1－2％接触者不久发生活动性结核病 30％接触者形成原发感染后成为潜伏感染者，其中10％可能在一生中某个时期发生结核病 余下2/3接触者并没有被结核菌感染 一名传染源在不同接触情况下传染健康人的相对数和绝对数。一般情况下，接触越密切，被感染的率越高，但被感染的绝对人数不一定多 图1 密切接触（内环）、一般接触（外环）和偶然接触的感染危险性，＋表示传染源，实心圆表示被感染接触者，空心圆表示未被感染接触者 结核菌感染 定义 结核菌进入人体内并生长繁殖，刺激宿主产生细胞反应 因为巨噬细胞可将进入的结核菌吞噬，通过溶菌酶、蛋白水解酶等发挥杀菌作用，将其清除。活力强的结核菌可能成活并生长繁殖 影响感染的因素 结核菌数量、活力和毒力 人体非特异性抵抗力（吞噬细胞及杀菌物质，颗粒蛋白，过氧化物酶，防御素溶菌酶及多种溶菌水解酶等）如在细菌增殖和宿主细胞反应之前结核菌被杀灭，则不能构成感染 遗传易感基因，当人群中易感基因人群比例达到30％时，结核感染、发病可能成倍增长 诊断结核感染的方法 结核菌素试验