基因工程(页)概述.ppt

主要内容 1、基因工程原理 ● 理论上的三大发现 （1）20世纪40年代发现了生物的遗传物质是DNA （2）20世纪50年代揭示了DNA分子的双螺旋结构和半保留复制机理 （3）20世纪60年代，确定了遗传信息的传递方式 ● 技术上的三大发明 （1）限制性核酸内切酶和DNA连接酶 （2）基因工程的载体 （3）逆转录酶的发现 限制性核酸内切酶(restriction endonuclease, RE) 是一类由细菌产生的能专一识别双链DNA中的特定碱基序列、并由此切割DNA双链结构的核苷酸内切酶，简称限制酶或切割酶。 根据酶的功能、大小和反应条件，及切割ＤＮＡ的特点，可以将限制性内切酶分为三类： Ⅰ型酶、Ⅱ型酶、 Ⅲ型酶 Ⅱ型酶（用途最广） 1970年，H.O.Smith和K.W.Wilcox在流感嗜血Rd株中分离出来的限制酶。 特点： 1. 在DNA双链的特异性识别序列部位，切割DNA分子，产生链的断裂; 2. 两个单链断裂部位在DNA分子上的分布，通常不是彼此直接相对的; 3. 因此，断裂形成的DNA片断，也往往具有互补的单链延伸末端。 限制酶（Ⅱ型） 特异识别及切割4?8个bp长度且具有回文序列的DNA片断 回文序列：是指该部位的核苷酸序列呈180O旋转对称;