基因重组技术生产胰岛素概述.pptVIP

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  • 2017-10-15 发布于湖北
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* S区的翻译产物为S多肽,由226个氨基酸残基组成;M多肽和L多肽(pre-S2-S和pre-S1-pre-S2-S)则分别由281个和389个氨基酸残基组成,Dane病毒颗粒除了含有大量的S多肽外,还有少量的M多肽和L多肽参与包装。 * 利用甲基营养菌巴斯德毕赤酵母作为受体细胞表达HBsAg,显示出比酿酒酵母系统更大的优越性。重组菌的构建过程如下:将HBsAgd 编码序列和用于选择标记的巴斯德毕赤酵母组氨醇脱氢酶基因PHIS4插入到甲醇可诱导型的AXO1启动子和AXO1终止子之间,构成环状重组质粒pBSAG151。用Bgl Ⅱ打开pBSAG151,使得AOX1启动子和AXO1终止子分别位于线型DNA片段的两端,并转化HIS ˉ的受体细胞。在HIS 的转化子中,重组DNA片段与受体染色体上的AOX1基因发生同源交换,单拷贝的HBsAg编码序列稳定地整合在染色体上。由于巴斯德毕赤酿酒酵母染色体DNA上还拥有表达水平较低的第二个乙醇氧化酶基因AOX2,因此转化子仍能在含有甲醇的培养基上生长。重组菌现在含有一定浓度的甘油培养基中培养,待甘油耗尽时,加入甲醇诱导HBsAg的表达,最终S蛋白的产量可达到受体细胞可溶性蛋白总量的2% ~3%,比含有多拷贝表达单元的重组酿酒酵母要高近一倍。 * * * 长期的植物生理学研究结果表明,植物对盐、碱、旱、寒、热等环境不利因素的自我调节能力很大程度上

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