超临界萃取各论编写举例技术分析.doc

各论编写举例 防 风 Radix Saposhnikoviae 本品为伞形科植物防风Saposhnikovia divaricata(Turcz．)Schischk．的干燥根。本实验所用药材购于亳州药材市场，经鉴定为防风Saposhnikovia divaricata(Turcz．)Schischk．的干燥根。 【性味与归经】辛，甘，温。归膀胱、肝、脾经。 【功能与主治】发表散风，胜湿止痛，止痉，止泻。用于感冒头痛，风湿痹痛，风疹瘙痒，破伤风。 【临床应用】 1．发表散风 主治外感风寒或风热表证，感冒头痛，风疹瘙痒证。 2．胜湿止痛 风寒湿痹证。 3．解痉 破伤风抽搐痉挛证。治疗破伤风以天南星、防风各等份，研细末，温酒调下并外敷疮口，临床应用具有较好疗效。 4．止泻 用于肝郁侮脾，腹痛泄泻。防风水煎服、治愈1例慢性腹泻5年的患者，临床具有较好疗效。 5．治疗崩中 防风去芦头，炙赤为末，每服6g，酒调下，临床疗效较好。 【化学成分】 1．挥发性成分 2-甲基-3-丁烯-2-醇(2-methyl-3-buten-2-ol)、戊醛(pentanal)、己醛(hexanal)、戊醇(pentanol)、己醇(hexano1)、辛醛(octanal)、壬醛(nonanal)、辛醇(octanol)、乙酰苯(acetophenone)、7-辛烯-4-醇(7-oeten-4-ol)、萘(naphthalene)、β-没药烯(β-bisabolene)、花侧柏烯(cuparene)、β-桉叶醇(β-eudesmol)、2-十九烷酮(2-nonadecanone)、9-羟基-8-十六烷酮(9-hyroxy-8-hexadecano)等。 2．色原酮类 升麻素(cimifugin)、亥茅酚(hamaudol)、叔-O-葡萄糖基亥茅酚(sec-O-glucosyl-hamaudd)等。 3．香豆素类 香柑内酯(bergapten)、欧芹属乙素(imperatorin)、珊瑚菜素(phellopterin)、补骨脂素(psoralen)等。 4．多糖类 酸性多糖saposhnikovan A和saposhnikovan C等。 【防风提取工艺研究】 1．SFE提取方法将药材粉碎成粗粉；装入超临界萃取釜中，以压力为22MPa、温度为35℃、流量为22L/h的条件进行萃取4h；以压力为6.5MPa；温度为36℃进行解析，萃取出浅棕红色半透明的油状物即得，萃取得率约为4.0％～4.5％。 2．常规提取方法取粉碎好的防风药材两份各200g，置挥发油提取器中，加1000ml水，连续提取14h，计算得油率，为0.18％～0.21％左右。 【(GC／MS分析】 1．仪器及色谱条件 仪器 HP5890ⅡGC／HP5972MS气／质联用仪 色谱条件 色谱柱为BPl(nonpolar)石英毛细管柱60m×0.22mm，0.25μm(澳大利亚SGE公司)；初始温度80℃，停留5min，以2℃／min速率一阶升温至140℃，停留20min，以1℃／min的速率二阶升温至260℃，停留10min。进样口温度280℃，柱流量1ml／min。 质谱条件 电离方式EI，电离电压1871mV，离子源温度182℃，扫描质量范围50～550ml/min。 2．分析结果 分别称取适量的防风超临界CO2提取物(防风－SFE)、挥发油(防风一WD)样品，用无水乙醇与正己烷(1∶1)混合溶剂溶解，分别配成10mg/ml的样品溶液，分别吸取1μl以无分流方式进样，得总离子流图，结果见图1(a．防风—SFE总离子流图；b．防风－WD总离子流图)。所得各色谱峰经峰纯度检测，并将得到的质谱数据经由Wileyl38质谱数据库检索，结果见表1。防风超临界CO2提取物中分离出17个色谱峰，鉴定出11个化合物，占气化产物总量的73.00％；其中主要成分人参炔醇占51.97％。防风水提挥发油样品中分离出31个色谱峰，鉴定出21个化合物，占气化产物总量的86.74％；其中主要成分人参炔醇占59.69％。 表×-1 防风GC／MS鉴定结果 a．防风－SFE总离子流图 b．防风－WD总离子流图 图×-1 防风总离子流图 【薄层色谱鉴别】 1．人参炔醇对照品溶液的制备称取人参炔醇对照品约6mg，加甲醇溶解并定容至2ml。即得。 2．防风醇提对照溶液的制备取防风对照药材粉末约2g，加甲醇25ml，超声提取30min，过滤，滤液浓缩至1ml，即得。 3．防风石油醚提对照溶液的制备取防风对照药材粉末约2g，加石油醚25ml，超声提取30min，过滤，滤液浓缩至1m1，即得。 4．防风超临界提取物供试溶液的制备取防风超临界提取物约200mg，加乙酸乙酯溶解并定容至10ml，即得。 5．防风挥