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茶叶茶多酚含量的测定
取10ml,加福林酚,无水碳酸钠。蒸馏水定容至25ml
取1ml,定容到100ml
0.2g茶叶样品
热水浴,浸提10min,离心
25ml待测液,测得吸光度A1,A1,A3。
100ml稀释液
10ml浸提液
实验流程:
④
③
②
①
茶叶茶多酚含量的测定方法(以农贸一班2组数据为例)
一、以没食子酸含量做标准曲线进行计算:
上图中的横坐标为每25ml没食子酸标准液中没食子酸的含量,纵坐标为吸光度值。
样品待测液含量对应关系:
含量稀释了10倍
25ml待测液中茶多酚含量=10ml稀释液中茶多酚含量=1ml浸提液中茶多酚含量的1/10=0.2g茶叶中茶多酚总含量的1/100。
由对应关系进行公式推导:
茶叶样品中茶多酚含量(%)=浸提液中茶多酚的含量/(样品质量*干物质含量)
浸提液中茶多酚的含量=1ml中茶多酚含量*10ml=10ml稀释液中茶多酚的含量*10*10ml=25ml待测液中茶多酚的含量*10*10ml
茶多酚含量(%)=A*V*d/(L*m*m1*(10^6)),稀释因子d应该为10。同时由于:A=K*X+b,所以此公式应该调整为:茶多酚含量(%)=[( A-b)*V*d/(L*m*m1*(10^6))]*100
A----待测液平均吸光度
b----标准曲线公式中的常量,本实验为-0.0134
V----浸提液体积本实验为10ml
d----稀释因子,在以没食子酸含量为横坐标的计算方法中,d=10
L----标准曲线斜率
m----样品质量,本实验为0.2
m1----样品干物质含量,本实验为80%
详细过程如下:
A1=0.885 A2=0.822 A3=0.784
平均光度值A=(A1+A2+A3)/3=0.830
将A值带入公式:茶多酚含量(%)= [( A-b)*V*d/(L*m*m1*(10^6))]*100,可以求得茶叶样品中茶多酚的含量=13.5%
二、以没食子酸浓度作标准曲线
上图中的横坐标为没食子酸标准溶液的浓度,纵坐标吸光度A
此时的计算公式推导过程为:
茶叶样品中茶多酚含量(%)=0.2g茶叶中茶多酚含量/(0.2*干物质含量)
0.2g茶叶中茶多酚的含量为=浸提液浓度*10
浸提液浓度=10ml稀释液浓度*100
10ml稀释液浓度=25ml待测液浓度*25ml/10ml
25ml待测液浓度可以由标准曲线公式:A=L*X+b测得。
综上,可推的计算公式为:茶多酚含量(%)=[(A-b)*V1*d*V/L*m*10^6*m1]*100
A----待测液平均吸光度
b----标准曲线公式中的常量,本实验为-0.0134
V1----待测液体积,本实验为25ml
d----稀释因子,本实验为100
V----浸提液体积,本实验??10ml
L----以浓度为横坐标获得的标准曲线的斜率
m----样品干物质含量,本实验为80%
m1----样品质量,单位为g。
将数据带入上述计算公式可得,茶叶样品中茶多酚的含量为:13.5%。(详细计算过程略)
要注意的是:
1.浸提液的体积并不是10ml,该实验为方便操作和计算,将浸提液体积默认为10ml
2.由标准曲线计算待测液浓度或含量时,要带入到标准曲线公式进行计算
3.由于实际实验操作步骤可能和教材要求不同,所以此列实验应注意结合实验的实际步骤进行公式推理和相关计算,在理解共识的基础上进行计算,切记不要盲目代公式。
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