选修实验细菌培养技术.docVIP

实验三：学习细菌培养的基本技术 实验原理：①要根据微生物的营养需要，采用相应的配方配制培养基。 ②培养基除满足微生物所需各种营养外，还要适宜的pH值。本实验所用的牛肉膏蛋白胨培养基应用广泛，适于多种细菌的培养。 ④配置好的培养基必须经过灭菌，一般采用高压蒸汽灭菌。在整个细菌接种培养过程中，一般要求无菌操作。 方法步骤： 一、培养基的配制 称量 ( 溶化 ( 调pH值 ( 培养基的分装 ( 加棉塞 ( 包扎 加水加热 边滴边搅拌 趁热分装 棉塞长度2/3在内 外加牛皮纸 随时用测pH值 培养基高度为1/5 挂上标签 二、灭菌 高压蒸汽灭菌的效果是细菌培养的关键。 灭菌原理:依据高压升温使菌体细胞蛋白质凝固变性失去生命力,将0.11MPa、121oC,维持30min彻底灭菌 操作：加水、装料 ( 加热、排气 ( 升压、保压 ( 降压、排气 加开水适当,试管 打开排气阀,加热至沸腾 压力至0.11MPa,T为121oC 压力降至0, 口向上,不能太挤 排气5～10min,关闭 控制热源，保压30min T100oC开阀 三、搁置斜面 当T接近50oC，将试管摆在一根