实验六植物组织基因组DNA的提取与分析(CTAB法)要点分析.pptVIP

六、注意事项 （1）叶片磨得越细越好。 （2）移液器的使用。 （3）由于植物细胞中含有大量的DNA酶，因此，除在抽提液中加入EDTA抑制酶的活性外，第一步（研磨）的操作应迅速，以免组织解冻，导致细胞裂解，释放出DNA酶，使DNA降解。 * 实验六 植物组织中DNA的提取与分析 温馨提示：1、请将教室水浴锅打开，温度调至65℃。2、实验中-20℃冰浴时，请将样品放入6309室冰箱冷冻层。 * （1）掌握植物组织中DNA提取的原理和方法。 （2）掌握DNA的琼脂糖凝胶电泳检测方法 一、实验目的 二、实验原理 通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞，由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响，在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。在液氮中研磨，材料易于破碎，并减少研磨过程中各种酶类的作用。 CTAB, SDS等离子型表面活性剂，能溶解细胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚，从而使DNA得以游离出来。 二、实验原理 再加入苯酚和氯仿等有机溶剂，能使蛋白质变性，并使抽提液分相，因核酸(DNA、RNA)水溶性很强，经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。 上清液中加入异丙醇或乙醇使DNA沉淀，沉淀DNA溶于