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作业指导书 文件编号： JSFY-JYK-ZY-001 发布日期 2011年11月30日 B版 修订号 O 批准日期 2011年11月30日 标题：丙氨酸氨基转移酶测定操作规程 第1页 共2页 编写人：崔福强 审核人：鲍红梅 批准人：崔福强 丙氨酸氨基转移酶测定操作规程 [临床意义] ALT是氨基酸代谢中所涉及的一个酶，分布于很多组织。在肝脏组织与肾脏组织中含量最高。组织破坏会使细胞内的酶进入血液循环。很多种疾病，比如肝炎、单核细胞增多症和肝硬化，都会发现血清ALT升高。但有些疾病例如心肌梗死，ALT不会特别高。因此ALT被认为是肝脏物异性酶。 [实验原理] 本法为IFCC推荐的动力学测定方法，反应式如下： L－丙氨酸＋ａ－酮戊二酸ALT 丙酮酸＋L-谷氨酸 丙酮酸＋NADH＋H+ LDH L-乳酸＋NAD+ [标本的收集与处理] 患者准备：无特殊要求。 类型：无溶血的血清或肝素化的血浆。轻微的溶血不会明显的影响结果，可是，红细胞内的ALT是血清中的3～5倍。收取标本后尽快分离血清。EDTA血清也可以用。应用EDTA血浆为标本结果乘以1.02将与血清标本的结果一致。 标本的稳定性：血清中的ALT在0～4°C稳定3天。当存放于－20°C稳定期长于3天。EDTA血浆中的ALT放在室温（15～30°C）或冰箱（2～8°C）可以稳定7天。 [仪器与材料] 北京松上A6半自动生化分析仪 山东潍坊三维丙氨酸氨基转移酶（ALT） 参与反应成分的最终浓度： 1.试剂R1 TRIS缓冲液（PH 7.5） 100mmol/L L-丙氨酸 500mmol/L 乳酸脱氢酶（LDH） 1200U/L 2.试剂R2 ａ－酮戊二酸 15mmol/L NADH 0.18mmol/L 作业指导书 文件编号： JXFY-JYK-ZY-001 发布日期 2011年11月30日 A 版 修订号0 批准日期 2011年11月30日 标题：丙氨酸氨基转移酶测定 第2页 共2页 编写人：崔福强 审核人：鲍红梅 批准人：崔福强 [注意] 可根据仪器要求按比例改变标本、试剂用量。 标本中ALT的吸光度变化值△A/分0.30时，将标本用生理盐水1：9稀释后再测定，结果乘以10。 若试剂空白吸光度小于0.800说明试剂失效，请勿使用。 生化仪光径不为1cm时，F＝4180/光径cm. 本试剂中含有叠氮钠，请勿吸入并避免与皮肤、粘膜接触。 实验废液因含有血清，须先进行消毒处理，再用大量水冲洗排放。 [试剂准备] 将4份R1与1份R2混合，2－8°C密封避光保存可稳定4周。工作液预先保温至37°C [操作程序] 打开仪器的电源开关（仪器的背面） 面板上的屏幕上面板上的屏幕上出现选择测试项目类别，选肝功类进入。 进入选择菜单，选ALT项目，然后屏显试验所有参数。 等温度达到37°C时，进入，然后吸入空白，然后样本测定。 [计算] 无需计算，结果自动以U/L显示。 [报告结果] 参考正常值 男性：≤42U/L 女性≤32U/L [注意事项] 操作过程的限制性：ALT的线性范围是0－1200U/L。样品浓度超过线性范围应稀释重做。可以手工加一份血清4份生理盐水，轻轻地混匀，当常规标本，结果乘以5。 作业指导书 文件编号： JSFY-JYK-ZY-002 发布日期 2011年11月30日 B版 修订号0 批准日期 2011年11月30日 标题：总胆红素测定操作规程 第1页 共2页 编写人：崔福强 审核人：鲍红梅 批准人：崔福强 总胆红素测定操作规程 [临床意义] 总胆红素增高临床上表现有黄疸，超过20.1umol/L时有临床意义，增高到34.2umol/L表现出黄疸体征。红细胞大量破坏、胆道阻塞、肝脏疾病，均可导致血中胆红素增高而引起黄疸。 [实验原理] 对氨基苯磺酸＋HCL+NaNO2 氯化重氮苯横酸＋NaCL 总胆红素＋氯化重氮苯横酸O 偶氮胆红素 [标本的收集与处理] 患者准备：空腹 类型：新鲜不溶血血清或血浆均可，样本收集后应尽快测定，注意避光。 [仪器与材料] 北京松上A6半自动生化分析仪 潍坊三维总胆红素定量检测试剂 试剂盒的组成： 试剂R 盐酸 0.7mol/L 对氨基苯磺酸 20umol/L