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创新项目实验结题报告 新世纪以来，土壤重金属污染问题，已经引起人们的高度重视。重金属会在土壤之中存在的并且长时间难以降解，对土壤有一定的破坏。具有长期性、滞后性的特点，在动植物体内能以有机物形式存在，并且可以通过食物链富集到人类上，对我们的健康造成损伤，财产潜在威胁。钻形紫菀，隶属菊科（Asteraceae)紫菀属，一年生草本。喜生长于潮湿含盐的土壤上，常见于沟边、河岸、海岸、路边及低洼地。8~11月开花结果，可产生大量瘦果。原产地北美洲，现广布于世界温暖地区，钻形紫菀1947 年发现于湖北武昌，目前中国河南、安徽、江苏、浙江、江西、云南、贵州、湖北、四川、重庆、广西、广东、福建、台湾均有分布，常见于田边及路埂上沿河岸、沟边、洼地、路边、海岸蔓延，主要危害秋收作物（棉花、大豆及甘薯）和水稻，还常侵入浅水湿地，影响湿地生态系统及其景观。随着温室效应加剧，钻形紫菀的生存能力越强，并且缺乏相对有效的治理方法。陆生植物毒性试验，包括植物种子发芽毒性试验。植物种子发芽毒性试验较其他毒性试验方法优点：一是方法简单，持续时间短；二是这种方法对毒物毒性比较敏感。，国内外对钻形紫菀的研究甚少通过本实验，我们探究钻形紫菀（Aster subulatus Michx）理化尤其是Zn重金属污染种子萌发影响，生理指标变化富集能力探究其Zn的适应能力以及对重金属污染土壤的修复作用为钻形紫菀的合理利用和相关研究提供科学依据。初步对钻形紫菀适应重金属的能力进行探究，并为进一步研究其富集重金属的能力提供科学理论依据，并且具有一定的创新性。本项目的创新特色集中体现在研究重金属对入侵植物的影响，探究入侵植物的富集能力通过入侵植物对重金属适应能力的分析，合理利用其价值上。 1.材料与方法 1.1材料供试植物种子采自安徽省芜湖市安徽师范大学，钻形紫菀叶片抗氧化酶活性的测定样品植物于安徽师范大学生命科学学院植物园内稳苗两周，选取高度大致相同植株用于后续试验。试验用土取自安徽师范大学赭山校区后山原田土表层0-20cm。土样采回后风干捣碎剔除杂物后过2mm筛。用ZnSO4·7H2O分析纯溶液与土壤混合均匀并在室温条件下均衡3天，取2kg污染土置于直径25 cm的塑料花盆备用。 Zn污染浓度设置为200,400,600,800mg/kg，每组3个重复。对照组Zn浓度为0，9个重复。试验期间，正常养护，保持土壤70％的含水量，60天后取新鲜叶片测定其生理生化指标。过氧化氢酶（CAT）的活性测定采用高锰酸钾滴定法。过氧化物酶（POD）的活性测定采用愈伤木酚法。 丙二醛（MDA） 含量的测定采用硫代巴比妥酸比色法1.3钻形紫菀种子萌发率的测定 供试种子采回放置一个月后，取出用蒸馏水洗净，晾干后摆放到平铺3层滤纸的培养皿中（所用培养皿已提前高压蒸气灭菌），加入五种Zn污染浓度（50,100,200, 400,600mg/l）的溶液10 ml，每个培养皿中放入50粒种子，每种处理均设3组重复。 设一组对照，Zn污染浓度为0，3个重复。观察记录种子发芽率，接连三天没有出现新种子发芽的培养皿进行最终萌发率的测定。实验在28 ℃光照培养箱中进行，光周期为12 h∶12 h（光∶暗比）发芽率GR（发芽率） = SN1（发芽种子数） / SN0（供试种子数）×100%。。 2.结果 2.1 Zn对钻形紫菀叶片抗氧化酶活性的影响 2.1.1在不同浓度Zn胁迫下POD活性变化 Zn浓度800mg/kg Zn浓度为0的对照组钻形紫菀POD活性小，和低浓度处理Zn(≤200mg/kg)，没有显著差异。随着Zn浓度的增加，POD活性显著增加。Zn污染浓度下的POD检测值 POD检测值 浓度(mg/kg) Zn 计算值 Ck 计算值 200 0.078 3.9 0.0089 4.45 400 0.417 20.85 0.177 8.85 600 2.008 100.4 0.067 3.35 图 1. 不同Zn污染浓度下的POD变化 2.1.2在不同浓度Zn胁迫下MDA含量变化 MDA是膜质过氧化的最终产物,其含量的高低代表膜质过氧化程度,是衡量膜质过氧化作用强弱的常用指标,在低浓度处理Zn(≤400mg/kg)下，实验组和对照组没有显著差异，在高浓度(≥600mg/kg)，钻形紫菀MDA含量显著降低。Zn污染浓度下钻形紫菀MDA含量 MDA检测值 Zn 浓度 450nm 532nm 600nm 计算值本 计算值书 含量ug/g 200 0.281 0.168 3.447 -21.3068 0.92624 3.001018 400 0.239 0.134 3.449 -21.5156 0.73045 2.366