(3)将目的基因导入微生物细胞: ①微生物作受体细胞原因: ②常用菌: ③常用法: ④转化过程: 大肠杆菌 Ca2+处理 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对少 Ca2+处理大肠杆菌 感受态细胞 目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 1.2 基因工程的基本操作程序 1.检测 ①检测转基因生物染色体的DNA 上是否插入了目的基因(导入检测) ——DNA分子杂交技术 四、目的基因的检测与鉴定 1.检测 ①检测目的基因 ——DNA分子杂交技术 ②检测目的基因是否转录出了mRNA ——分子杂交技术 ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 (表达检测)——抗原-抗体杂交 2.鉴定(个体水平) 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 四、目的基因的检测与鉴定 * * 通过复制(DNA复制) ——传递遗传信息 通过转录、翻译控制蛋白质合成 ——表达遗传信息 一、原核细胞的基因结构 DNA 有遗传效应的DNA片段——基因 编码区 非编码区 非编码区 编码区上游 编码区下游 调控遗传信息的表达 (调控序列) 编码蛋白质 (编码序列) 编码区:能转录为相应的信使RNA, 进而指导蛋白质的合成, 即能编码蛋白质的区段 非编码区:不能转录为相应的信使 RNA,更不能指导蛋白质
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