沉淀反应6.ppt
电泳原理 pH8~8.6 缓冲液中 阴粒离子多 等电点pH3~4 分子量较小 等电点pH5~6 分子量较大 阴粒离子少 向正极电泳力小 向正极电泳力大 1.电场强度:恒定电流2~4mA/cm,恒定电压2~10V/cm 4.电渗作用:在电场中液体相对于固体的移动。 2.溶液pH值:缓冲液偏碱性,蛋白质带负电荷 3.离子强度:高,泳动慢;低,泳动快,缓冲能力↓ 0.05mol/L、pH8.6的巴比妥缓冲液 电渗作用 带负电的琼脂 静电感应 - + - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + + + + + + + + + A V0 - - - - - - - - - - - V 一)、对流免疫电泳 (counter immunolelctrophresis,CIEP) (一) 原理 在pH8.6的琼脂凝胶中: 抗体球蛋白:带少量负电荷且分子较大,因此电泳力<电渗力,泳向负极,放(+); 抗原蛋白质:带较强负电荷且分子较小,因此电泳力>电渗力,泳向正极,放(-); 电泳一定时间后,二者相向运动,形成肉眼可见的沉淀线。 示意图 I=3~4mA/cm、30min + 1:Ag与Ab对应; 2:Ab>Ag,Ag为 弱阳性 3:Ag>>>Ab, Ag强阳性 4:Ag>>Ab
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