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GST融合蛋白诱导、分离、纯化及鉴定 Glutathione S-Transferase (GST)，也有叫谷胱甘肽巯基转移酶的 一、基因诱导表达一般过程： 1-2mL菌液加入到150mL(LB液体培养基中)-----37℃摇菌培养（220-250rpm）1-2h(稍微浑浊即可)加IPTG至终浓度0.5 uM（或1 uM） 20 ℃ （或16-37 ℃ ）低速诱导12-180rpm （6-18h） 蛋白的分离（以下步骤均在冰上操作）： 收集菌，每升菌液约以50 mL PBS重悬，加入1%Triton X-100（v/v），1％β-巯基乙醇（v/v），PMSF（终浓度1 mM）； 超声破碎菌体，15000 g，20min离心取上清。 在1KG至10KG频率下处理10-15分钟，此法的缺点是在处理过程会产生大量的热，应采取相应降温措施，时间以及超声间歇时间、超声时间可以自己调整，超声完全了菌液应该变清亮，如果不放心可以在显微镜下观察。对超声波及热敏感的蛋白和核酸应慎用。 PMSF即Phenylmethanesulfonyl fluoride，中文名为苯甲基磺酰氟。分子式为C7H7FO2S，分子量为174.19，纯度99%。常用生化试剂，用于抑制蛋白酶. GST纯化系统其实就是凝胶亲和层析系统。该纯化柱中，凝胶手臂上通过硫键结合一个谷胱甘肽。然后利用