3发酵工程种子的扩大培养详解.pptVIP

长江大学生科院生物工程系 　　　发酵工程 课件 Fermentation Engineering 对于不产孢子的赤霉素生产菌（Gibberelline fujikuroi），也可用大米固体培养基在茄子瓶中培养菌丝体，用作种子罐种子。 不产孢子的细菌，如生产谷氨酸的棒状杆菌（Corynebacterium）、短杆菌（Brevibacterium），生产上一般采用斜面营养细胞进行扩培，再转入液体摇瓶培养，获得细胞悬液再接种。 种子的扩大培养 （四）种子质量控制 缬霉素发酵液中氨基氮的测定 氨基酸中的-NH3+基的pk值常在9.0以上，不能用一般的酸碱指示剂（包括酚酞），以氢氧化钠溶液作滴定测量。但可以用甲醛滴定法测量。在pH中性和常温条件下，甲醛迅速与氨基酸中氨基相互作用，使滴定终点移至pH9.0左右，在该过程中指示剂酚酞不与甲醛作用。pH9.0正是酚酞的变色范围，因此，可以用酚酞作为指示剂，以氢氧化钠溶液来滴定-NH3+基上的H+，每释放一个氢离子，就相当于一个氨基酸。 反应如下 R-NH3+ H++R-NH2 R-NH2+2CH3CHO R-N(CH2OH)2 实验步骤 1.将发酵液过滤，取滤液2.5mL于 250mL三角瓶中，加蒸馏水约50mL,加甲基红指示剂2~3滴，加1mol/LHCl溶液1～2滴，使