分子生物学复题(郭洁).docVIP

2013年分子生物学（分子遗传学）硕士生复习题 阐述你对基因概念的理解和诠释。举例解释蛋白质二级结构、超二级结构（MOTIF）、三级结构、DOMAIN和四级结构。简述Proteasomes结构与功能。简述泛素化蛋白降解途径。Proteasomes），这条通路包活5步：1）泛素激活酶（E1）在ATP存在的条件下，催化游离泛素活化，形成过渡复合物泛素—AMP，然后，E1以硫羟酸酯键与泛素的C端结合，形成泛素—E1复合物。2)泛素结合酶（E2）取代泛素—E1复合物中的E1，形成泛素—E2复合物，E1离开泛素。3）泛素连接酶（E3）与E2协同作用，将泛素的C末端羧基与底物蛋白的赖氨酸残基以共价键结合，使底物蛋白连上一个泛素标记；随后，底物蛋白泛素链的LYS残基在E3的催化下与泛素—E2复合物作用，再连接一个泛素，该过程重复多次，从而使靶蛋白多聚泛素化。4）多聚泛素化的蛋白被蛋白酶体识别并降解成短的小肽。5）同时在去泛素化酶（DUB）的催化下，泛素链从底物蛋白上脱落，分解成单个游离的泛素。游离的泛素在参与其他底物蛋白的泛素化过程。 何谓Long Interspersed Nuclear Elements，你认为该序列的进化起源是什么？DNA序列一般都是中度重复序列。根据重复序列的长度可以分为4DNA转座子。 Long interspersed nuclear elements: 目的基因组测序发现,在哺乳动物的基因组中,单拷贝基因内和基因之间散布着大量的转座子,这些转座子曾经被认为是无用的“垃圾序列”。这些转座子中最有代表性的就是LINE-1(long interspersed nuclear elements 1,长散布重复序列1,简称L1)。L1是人类基因组中含量最多的自主性逆转录转座子,约占人类基因组DNA的17%。哺乳动物基因组中约1/3的成分都直接或间接跟L1逆转录转座有关。L1有2个开放读码框(opened reading frame),编码2种蛋白质:ORF1——编码的蛋白有RNA结合活性,ORF2——编码的蛋白有核酸内切酶和逆转录酶两种活性,2种蛋白都是L1转座所必需的。迄今为止已发现L1与多种生物学现象关联,包括基因突变, X染色体失活,基因重排,基因表达沉默,肿瘤发生,生物进化等。在机体免疫系统中,T细胞和B细胞抗原受体等位基因排斥,IL-2、IL-4的基因表达都与L1有关。 最近,已有研究表明:L1序列能够下调基因的表达——Han将L1/2的ORF2(L1重复序列的一部分)和LacZ分别插入到GFP报告基因下游。与插入LacZ的序列比较,。。 LINE是可以自主转座的一类反转录转座子，来源于RNA聚合酶Ⅱ的转录产物L1是LINE中的一种重复序列，长约6 500bp，哺乳动物基因组中的拷贝数可多达10万份，主要集中在AT富集区。从LINE的结构分析，它并不具有反转录病毒特有的LTR，因此曾把LINE归于非病毒超家族。测序的结果发现LINE L1的一个可读框同反转录酶是同源的，这提示LINE可能来源于能够编码转座所需的酶进行自主转座的可动元件，所以现在在分类时被归人病毒超家族。L1插入片段的全长原初元件可能是哺乳动物中有活性的反转录转座子的来源。L1被认为是人类基因组中主要的可动因子，它不仅能自主转座，而且它的蛋白质产物可促使非自主转座因子的反转录转座。简述大肠杆菌DNA聚合酶III各亚基的功能。DNA pol Ⅲ是一种多亚基的蛋白。在DNA新链的从头合成（de novo）中起复制酶的作用 DNA聚合酶III是多亚基组成的蛋白质,它在细胞中含量很少,在每个细胞中只有10～20个拷贝的全酶，Pol III全酶由α,β,γ,δ,ε,θ,τ,δ,χ,ψ10种不同的亚基组成 核心酶由α, ε，θ组成。 α亚基polC 基因编码，具有5→3方向合成DNA的催化活性,每秒可以合成8个核苷酸ε亚基dnaQ基因编码，具有3→5外切核酸酶的校对功能,在体内其基本功能是控制复制的忠实性,ε亚基常与α亚基形成一个紧密的1:l复合物,协同发挥功能. θ亚基holE基因编码，使核心酶相互连接 τ亚基使核心酶形成二聚体，与模板连接，具有ATP活性。 β亚基是以二聚体的形式存在的.在复制过程中β二聚体环绕着DNA,并能在DNA上自由滑动,构成一个滑动钳.滑动钳可把全酶束缚在模板DNA上,从而保证高度的进行性和聚合反应速度。 γ复合物是β滑动钳的载体,可帮助β滑动钳结合到DNA上. γ复合物含有5个不同的亚基,形成一种化学计量为γ2δ1δ1χ1ψ1的结构. β二聚体自己并不能组装到DNA 上 ,它是通过γ复合物与ATP协同作用催化ATP的水解而组装到DNA上的.阐明端粒结构与端粒酶的功能。端粒是真核细胞染色体末端的特殊结构，是由端粒DNA和与端粒DN