分子生物学实验2014年详细分解.docVIP

微量移液器的使用方法 质粒DNA (pBlueScriptII（SK）)的碱法提取 大肠杆菌总DNA的抽提 质粒和总DNA的酶切及琼脂糖凝胶电泳检测 重组片段的回收 CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞 重组片段的连接和转化 蓝色白色菌落法筛选重组子及重组比例的计算 PCR(设计实验) 分子生物学实验计划 第一部分实验：熟悉实验室环境 实验一 微量移液器的使用方法 第二部分实验：蓝色白色菌落筛选重组子 实验二 质粒DNA (pBlueScriptII（SK）)的碱法提取 实验三 大肠杆菌总DNA的抽提 实验四 质粒和总DNA的酶切及琼脂糖凝胶电泳检测 实验五 重组片段的回收 实验六 CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞 实验七 重组片段的连接和转化 实验八 蓝色白色菌落法筛选重组子及重组比例的计算 第三部分实验：设计实验 实验九 PCR 第一部分实验： 熟悉实验室环境 实验一 微量移液器的使用方法 实验原理：　微量移液器是一种在一定容量范围内可随意调节的精密取液装置（俗称枪），基本原理是依靠装置内活塞的上下移动，气活塞的移动距离是由调节轮控制螺杆结构实现的，推动按钮带动推动杆使活塞向下移动，排除活塞腔内的气体。松手后，活塞在复位弹簧的作用下恢复原位，从而完成一次吸液过程。 1、设定好移液器的读数（1μl，5μl，10μl），按到第一档，垂直进入液面几 2、缓慢松开控