生物化学思考题
蛋白质
1、蛋白质含量的测定方法有哪些?
答:蛋白质含量的测定方法主要有:
(1)凯氏定氮法:
蛋白质含量=蛋白质含N量×6.25
(2)紫外比色法
(3)双缩脲法
(4)Folin—酚法
(5)考马斯亮兰G—250比色法
2、蛋白质的基本组成单位是什么?蛋白质经过怎样处理才可产生这些基本组成单位? 蛋白质的基本组成单位是蛋白质经过处理可产生单位1)酸水解:常用 6 mol/L的盐酸或4mol/L的硫酸在105-110℃ 20小时左右。
(2)碱水解 :一般用5 mol/L氢氧化钠煮沸10-20小时。
(3)酶水解:已有十多种蛋白水解酶,如胰蛋白酶、糜蛋白酶、热激蛋白酶等。反应条件温和,酶水解时间长,反应不完全。
3、已知末端α-COOH,pK3.6,末端α-NH3+pK8.0 ε-NH+3pK10.6。
计算Ala-Ala-Lys-Ala的等电点。
4、简述蛋白质一级结构的测定顺序。
答:测定蛋白质一级结构的先后顺序为:
(1)测定蛋白质分子中多肽链的数目。
(2)拆分蛋白质分子的多肽链。
(3)断开链内二硫键。
(4)分析每条多肽链的氨基酸组成比及数目。????
(5)鉴定多肽链的N、C瑞残基。
(6)裂解多肽成小的肽段。
(7)测各肽段的氨基酸序列。
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