双分子荧光互补技术及其在蛋白质相互作用研究中的应用介绍.docVIP

双分子荧光互补技术及其在蛋白质相互作用研究中的应用 摘 要 双分子荧光互补技术是近年发展起来的用于体内或体外检测蛋白质相互作用的一项新技术。该技术是将荧光蛋白在合适的位点切开形成不发荧光的2个片段，这2个片段借助融合于其上的目标蛋白的相互作用，彼此靠近，重新构建成完整的具有活性的荧光蛋白分子，从而产生荧光。BiFC方法简单直观，具有可视性的特点，对温度敏感，荧光片段种类较多，被广泛地应用到不同的细胞中，既可以检测蛋白之间的相互作用，也可以定位蛋白质相互作用的位点。此外，BiFC还能在蛋白构型的确定以及的检测方面发挥作用。经过若干年的发展，双色荧光互补技术已经发展成包括多色荧光互补技术，BiFC和FET联用技术以及BiFC和YTH联用技术在内的多种技术，拓宽了BiFC的应用。 关键词双分子荧光互补技术蛋白质片段互补 荧光蛋白 蛋白质相互作用 蛋白质之间的相互作用(Protein-protein interactions，PPIs)形成了细胞中的调节网络，用来调控细胞的许多功能。因此，研究蛋白之间的相互作用对于深入了解许多生命过程具有非常重要的意义。迄今为止，已经建立了多种技术和方法用于研究蛋白与蛋白之间的相互作用，如酵母双杂交技术(Yeast two-hybridYTH)，荧光共振能量迁移(Fluorescence resonance energy transferFRET)和蛋白片