蛙心搏的观察与描记期外收缩与代偿间歇和蛙类离体心脏灌流介绍.docVIP

蛙心搏的观察与描记期外收缩与代偿间歇和蛙类离体心脏灌流 实验日期：5月7号 室温： 28℃ 一、实验对象与实验材料 蛙 3只 常规手术器械、蛙板、蛙心夹、毁髓针、棉球、滴管、纱布、棉线、任氏液、小烧杯（或培养皿）、污物缸 秒表（手机秒表）、两个针头（针灸针）、双针形露丝刺激电极、张力换能器、支架、滑轮、双凹夹、PowerLab生理实验系统、蛙心插管（斯氏套管）、套管夹 0.65%NaCl溶液，5%NaCl溶液，2%CaCl2溶液，1%KCl溶液，1:5000肾上腺素，1:10000乙酰胆碱溶液，300U/ml肝素溶液 二、实验方法与步骤 (一）蛙的心搏观察 双毁髓，暴露蛙心脏：小心剪去心包膜。 观察蛙心脏结构 观察心搏过程，记录正常心跳次数 斯氏第一结扎，观察记录静脉窦、心房和心室 斯氏第二结扎，观察记录静脉窦、心房和心室 重复步骤1制备另一个蛙心暴露，用于下面的心搏曲线实验 （二）蛙的心搏曲线与心电图记录 连接实验装置：PowerLab刺激输出线接双针形刺激电极，张力换能器接通道2，通道3生物电输入线接针形电极 用蛙心夹轻夹心尖连接张力换能器，可用滑轮，棉线适当延长点，角度放低 开机，打开chart软件，分别设置ch2和ch3放大参数，设置刺激为单脉冲。 针形电极插入蛙上下肢皮肤，连接通道3 观察正常的蛙心搏曲线和心电图记录 （三）期外收缩与代偿间歇实验 在方法二的基础上，将刺激电极放到心室部位，注意尽量不影响心脏的收缩舒张 分别在心室的收缩期，舒张早期、中期和晚期给予适当强度单脉冲（阈上刺激），观察期外收缩和代偿间歇的发生。 保存数据 进入方法四，制备蛙的离体心脏灌流装置 （四）蛙离体心脏灌流装置 双毁髓，暴露蛙的心脏，分辨连接蛙心脏的血管：动脉圆锥、左主动脉和右主动脉，静脉与静脉窦 用斯氏蛙心插管法制备离体蛙心。 （五）离体心脏灌流实验项目 记录正常心搏曲线，准备好加药标记，以下实验过程中保持chart连续不停的记录 滴加0.65%NaCl溶液并标记，观察到心搏明显变化后，吸去套管内溶液并同时做冲洗标记，用新鲜的任氏液清洗2~3次，待心搏曲线恢复正常。注意，换液时切勿碰套管，保持灌流液面一致。（以下实验同）。保持Chart连续采样直到实验结束。 滴加5%NaCl2~6滴 4.滴加2%CaCl2溶液1~3滴实验 5.滴加1%KCl溶液1~2滴实验 6.滴加1~2滴肾上腺素溶液（1:5000）实验 7.滴加1~2滴 1:10000乙酰胆碱溶液实验 8.实验结束，保存数据，回放记录，卸下实验装置，清理仪器、桌面卫生，并关PowerLab和电脑电源 三、实验结果： 蛙心搏的观察与描记 表1.斯氏结扎记录表 实验项目 频率/次*min-1 静脉窦 心房 心室 对照 60 55 55 第一结扎 60 42 42 第二结扎 60 42 37 实行斯丹尼氏第一结扎后，静脉窦收缩的频率为60次·min-1，而心房和心室的收缩频率相同均为42次·min-1；实行斯丹尼氏第二结扎后，静脉窦收缩的频率为60次·min-1，心房的收缩频率为42次·min-1，心室的收缩频率为37次·min-1。 期外收缩与代偿间歇的观测 图一、 刺激收缩期及舒张期早期蛙心室肌的期外收缩及代偿间歇 图二、刺激舒张期中期蛙心室肌的期外收缩及代偿间歇 图三、刺激舒张期后期蛙心室肌的期外收缩及代偿间歇 蛙类斯氏离体心脏灌流 图四、正常的蛙心搏曲线 图五、5%NaCl2对蛙离体心脏活动的影响 图六、肾上腺素对蛙离体心脏活动的影响 图七、2%CaCl2对蛙离体心脏活动的影响 图八、1%KCl对蛙离体心脏活动的影响 四、分析讨论： (1)关于蛙心搏过程的分析: ①斯氏第一次结扎：实验过程中观察到房室沟结扎后，的收缩基本不变，心室先停止收缩，隔一段时间之后又恢复收缩，但收缩的频率比原来为慢从传导至心室的被阻断，分离静脉窦与心之间的传递心脏的自律性完全靠静脉窦来提供，如果截断静脉窦与心脏之间的传递，因为静脉窦对异位起博点有抑制作用，心脏会停止跳动一段时间而后房室交界处开始搏动，因为房室交界的自动频率与静脉窦的频率慢，所以减慢。结扎后，的收缩基本不变，心室先停止收缩，隔一段时间之后又恢复收缩，但收缩的频率慢斯氏第二次结扎是阻断交界处截断与心之间的传递那则由浦肯野纤维进行异位起博因为静脉窦对异位起博点有抑制作用，心会停止跳动一段时间浦肯野纤维开始搏动，搏动频率比房室交界更慢，所以心跳动会更加缓慢。心室肌特长的不应期可以确保心搏有节律地工作而不受过多刺激的影响，不会象骨骼肌那样产生强直收缩从而导致心脏泵血功能的停止。有利于心脏进行长期不疲劳的舒缩活动，而不致于象骨骼肌那样产生强直收缩而影响其射血功能。 6