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陈金龙 荧光基本原理 荧光是发光体分子中原子的核外电子由高能级回跳到低能级所产生的辐射。某些物质吸收了与它本身的特征频率相同的光量子后，其原子中的电子被激发到较高的能级，从而产生吸收光谱。有些物质，当用紫外光线照射时，它吸收了某种波长的光后还会发射出各种颜色和不同强度的光；而当紫外线停止照射后，这种光也随之消失，这种光称为荧光。荧光是跃迁到激发态的电子直接从单重激发态以辐射方式跃迁到基态所发射的光。荧光的波长比吸收的紫外线的波长要长些。由于物质的分子结构不同，所吸收的紫外线和所发射的荧光的波长也不同。被这些物质吸收的紫外线称为激发光，产生的发射光即荧光。物质的荧光有两种：自发性荧光和诱发荧光。后者常用，能产生荧光的生物染色剂称为荧光染料或荧光探针，组织或细胞的荧光染色只有在配备了适当光源的荧光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜下才能显示和观察。 常见染料种类 荧光染料泛指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。它们大多是含有苯环或杂环并带有共轭双键的化合物。荧光分子探针主要包括荧光基团、连接基团和识别基团。荧光基团是发出光学信号的信息源,识别基团是可以与待检测物特异性结合的基团,而连接基团是连接荧光基团和识别基团的部分。 常规的荧光染料：1）小分子。香豆素；酞菁染料；异硫氰酸酯类（异硫氰酸酯荧光素 FITC,罗丹明RhB,Rh6G）；罗丹明（RhB, Rh6G）；青色