大肠杆菌非中断杂交基因定位介绍.docxVIP

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2016-11-25 发布于湖北
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大肠杆菌非中断杂交基因定位介绍.docx

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大肠杆菌非中断杂交基因定位院系：生命科学学院班号：周三上午第5组组员：王笑梅、金岚欧阳智山、阿布都实验日期：2015年12月9日实验结果：我们小组对B~G板上生长的菌落数进行了统计，4个人的统计结果如下表所示：表1本小组B~G板菌落统计表组员平板上生长的菌落性质BCDEFG1阳性173929174027阴性795460774471无法确定471161622阳性173630211731阴性735965747362无法确定105551073阳性173615111925阴性836182887566无法确定0331694阳性333928336541阴性615653612239无法确定651961320表2本小组B~G板结果统计表B(arg)C(purE)D(trp)E(his)F(lac)G(gal)119.042.534.520.048.028.0222.038.532.523.522.034.5317.037.516.511.522.029.5436.041.532.536.071.551.0平均生长菌落数23.540.029.022.840.935.8菌落生长百分数23.5%40.0%29.0%22.8%40.9%35.8%重组频率23.5%40.0%29.0%22.8%40.9%35.8%本实验的选择培养基有B~G，共6个，其中B培养基不加精氨酸，C培养基不加腺嘌呤，D培养基不加色氨酸，E培养基不加组氨酸，F培养基以乳糖为碳源，G培养基以半乳糖为碳源，每一种培养基都能验证一个基因的表达与否，且基因重组的频率与距离原点的距离有关，所以根据不同培养基中的存活菌数可以间接判断重组频率，也就可以得知基因排列的大概顺序，做出染色体图。由此，我们小组得出的基因顺序为：F-C-G-D-B-E，即lac-pueE-gal-trp-arg-his。分析得到的染色体图如下：lacpurEhisgaltrparg图1本小组实验结果推测染色体图由于一个小组的实验数据有限，可能产生较大误差，所以我们综合了全班的实验数据，得到如下表所示的结果：表3全班结果统计表板号组号BCDEFG板号排序一26.538.23229.54737.8FCGDEB二18.2536.7541.7529.8561.531.5FDCGEB三12.7527.2526.524.557.2536.75FGCDEB四15.37538.87525.625045.62524.875FCDGBE五23.5402920.2540.87535.75FCGDBE六9.527.6712.6733.82013.67ECFGDB平均值17.6534.7927.9227.5845.3830.06FCGDEB由表3可知，本班结果得到的基因顺序为FCGDEB，即lac-pueE-gal-trp-his-arg。分析得到的染色体图如下：lacpurEarggaltrphis图2全班实验结果推测染色体图为了进一步减小实验数据产生的误差，我们还综合了全年级的实验数据，得到如下表所示的结果：表4全年级结果统计表板号班次BCDEFG板号排序周三上午183528284530FCGDEB周三下午303626175328FCBGDE周四上午104645195942FCDGEB周四下午17.0842.1338.2920.2567.6338.29FCDGEB\FCGDEB全年级结果18.6339.6434.2521.1156.4234.62FCGDEB由表4可知，本年级结果得到的基因顺序为FCGDEB，即lac-pueE-gal-trp-his-arg。分析得到的染色体结果如下：lacpurEarggaltrphis图3全年级实验结果推测染色体图表5历年结果统计表学年板号排序学生年级2010-2011FGCDE2012FCDGE2013FCDGE2014FCGDE2015FGCDE2016FCGDEB2013结果讨论通过相关资料的查询，能够知道实际的基因顺序为F-C-G-D-E-B，即lac-purE-gal-trp-his-arg，与全班和全年级得到的基因顺序几乎完全一致，而我们组得到的结果为F-C-G-D-B-E，仅调换了E和B，即his和arg的顺序，故本小组实验结果统计与实际情况相比出现了误差。再由表5观察历年实验结果，只有两年与理论值相同，故存在一定实验误差。分析整个实验过程，我们猜测误差主要出在两个方面，一是操作误差，二是计数误差。1、操作误差因实验在超净台中进行且无污染出现，排除杂菌影响的原因。故操作误差主要可能产生在以下两方面：（1）在点种的时，为提高效率，两位同学同时进行。分别从两个A板中沾取菌落，再点到B~G板