2.3.1DNA是主要遗传物质.ppt

实验材料：小鼠及肺炎双球菌 1.将无毒性的R型活细菌注射到小鼠体内，不死亡。 实验 二 ——艾弗里及同事的肺炎双球菌体外转化实验 35S标记噬菌体侵染细菌实验中，按理论上沉淀物中应没有放射性，而实验中放射性低，为什么？ 因为搅拌不充分，有少量35S的噬菌体蛋白质外壳吸附在细菌的表面，随离心到沉淀物中。 如何获得被35S标记的亲代噬菌体或32P标记的亲代噬菌体？ 考虑到大肠杆菌和T2噬菌体的关系，先用含35S的培养基培养大肠杆菌，再用上述大肠杆菌培养T2噬菌体，得到蛋白质含有35S标记的亲代噬菌体。 方法同上。 注意：不能用32P和35S的培养基同时培养大肠杆菌，同时获得32P标记DNA，35S标记蛋白质的噬菌体，分不出是谁的放射性。 背景资料： 可是，艾弗里的实验不但没有使科学界接受 反而引起了科学界许多人怀疑。 在1949年艾弗里及同事将DNA中蛋白质的污染降到0.02%，但仍未能改变人们的观点。 是否有更好的实验材料,可以不用经过人工 提纯DNA，就能单独地去观察DNA或蛋白质的作 用呢？ 终于在1952年，由美国科学家赫尔希和蔡斯找到了一种理想的实验材料——T2噬菌体,通过噬菌体侵染细菌的实验从而证实了… … 实验材料：T2噬菌体、大肠杆菌 噬菌体的结构模式图 三.噬菌体侵染细菌的实验 T2噬菌体中 60%是蛋白质, 40%是DNA.. T2 噬菌体的特点 ① 是一种专门寄生在大肠杆菌体内的病毒 ② 头部和尾部的外壳是由蛋白质构成，头部内含有DNA ③在自身遗传物质的指导下进行繁殖,原料来自大肠杆菌 ④?子代噬菌体从宿主细胞裂解释放。 噬菌体 大肠杆菌 噬菌体侵染细菌的动态过程： 侵入别的细菌 合成 组装 释放 吸附 侵入 合成 组装 释放 吸附 动画 首先，噬菌体的尾端吸附在细菌的表面 侵入 然后， 噬菌体通过尾轴把DNA全部注进细菌体内，而蛋白质外壳则留在细菌体外，不起作用。 噬菌体的 DNA 在细菌体内，使细胞本身的 DNA 解体，同时利用细菌的化学成分合成噬菌体自身的 DNA和蛋白质， 这些新合成的 DNA 和蛋白质外壳组装出很多个与亲代一模一样的子代噬菌体。 最后，这些噬菌体由于细菌的解体而被释放出来，再去侵染其他的细菌。 三、噬菌体侵染细菌的实验 1952 1、实验设计思路： 3、实验过程： 把蛋白质和DNA区分开，直接地、单独地观察DNA和蛋白质的作用 1 标记细菌 细菌+含35S的培养基 细菌+含32P的培养基 含35S的细菌 含32P的细菌 2 标记噬菌体 噬菌体+含35S的细菌 噬菌体+含32P的细菌 含35S的噬菌体 含32P的噬菌体 3 噬菌体侵染细菌 含35S的噬菌体+细菌 含32P的噬菌体+细菌 :上清液放射性很高,沉淀物放射性很低 : 上清液放射性很低,沉淀物放射性很高 2、实验方法：放射性同位素标记法 三.噬菌体侵染细菌的实验 实验原理和方法 蛋白质的组成元素： D N A 的组成元素： （标记32p） （标记35s ） 标记噬菌体方法： 在分别含有放射性同位素32p 和35s的培养基中培养细菌 分别用上述细菌培养T2噬菌体，制备含32p 的噬菌体和含35s的噬菌体 同位素标记法 C、H、O、N、S C、H、O、N 、P 同位素标记法： 同位素用于追踪物质运行和变化过程时，叫做示踪元素。用示踪元素标记的化合物，化学性质不变。人们可以根据这种化合物的性质，对有关的一系列化学反应进行追踪。这种科学研究方法叫做同位素标记法。 实验步骤 标记细菌　　　 标记噬菌体 噬菌体侵染细菌（短时间保温） 搅拌离心　 观察放射性的分布 “短时间”：保证子代噬菌体的DNA和蛋白质在大肠杆菌中正处于合成阶段，子代噬菌体还没有组装好，或虽已经组装但并未使细菌发生裂解 “保温”：为噬菌体培养提供适宜的恒定的温度，以保证酶的活性。 搅拌的目的：使吸附在细菌上的噬菌体颗粒与细菌分离 离心的目的：让上清液中析出重量较轻的噬菌体颗粒，而离心管的沉淀物中留下被感染的大肠杆菌。 内部DNA不存在了的噬菌体外壳 被35S标记的噬菌体 被32P标记的噬菌体 被35S标记的噬菌体与细菌混合 被32P标记的噬菌体与细菌混合 搅拌后离心 离心后 上清液的放射性高 沉淀物的放射性低 在新形成的噬菌体中没检测到35S 搅拌后离心 离心后 上清液的放射性低 沉淀物的放射性高 在新形成的噬菌体中检测到32P 用被标记的噬菌体 侵染未标记的细菌 32P标记噬菌体侵染细菌实验中，按理论上上清液中应没有放射性，而实验中放射性低，为什么？ 保温时间过短，部分噬菌体没进入大肠杆菌，离心后分布于上清液中。 保温时间过长，噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放子代经离心后分布于上清液 * * * * * XXX将肺炎 注入小鼠提内观察小鼠症