酶联免疫吸附技术在食品安全检测中的应用讲义.docVIP

酶联免疫吸附技术在食品安全检测中的应用 摘要: 酶联免疫吸附是将抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用相结合发展建立的一种免疫分析技术。文中主要从农药残留、兽药残留、违禁药物、转基因食品、病原微生物、生物毒素以及其他成分等几方面, 对该技术在食品安全检测中的应用进行了综述, 并提出了存在的问题以及展望。 关键词: 酶联免疫吸附技术; 食品安全检测; 应用 Application of ELISA technology on food safety detection Abstract: Enzyme-Linked Immunosorbent Assay is an immunoassay technology established on the highly specific-antibody reaction and efficient catalysis is of enzyme. In this paper,the application of ELISA on food safety detection is reviewed, including pesticide residue,animal drug residue,forbidden drugs,genetically modified foods,pathogenic microorganisms,biotoxin and others,and the existed problems and corresponding methods to solution are proposed. Key word: enzyme-linked immunosorbent assay;food safety detection;application 食品安全问题是全球关注的焦点,它直接影响人类健康和经济发展,几年前的苏丹红事件、啤酒甲醛风波、人造蜂蜜事件、乃至今年的三鹿奶粉事件都给人们敲响了食品安全的警钟。如何快速、有效检测食品中的污染物残留,保证食品的安全供应是食品检验中的一个重点。酶联免疫吸附技术(ELISA)是在免疫荧光和放射免疫分析技术基础上形成的,将抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用相结合的一种免疫分析方法[1]。该方法操作简便、快速、有效、特异性强,能广泛用于临床标本、药物残留、转基因食品以及病原微生物检测等多个领域。本文主要概述了酶联免疫吸附法在食品安全检测中的研究及应用前景。 酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,简称ELISA)是一种固相酶免疫分析方法。它始于1971年En-gvall用碱性磷酸酯酶标记的免疫球蛋白测定IgG,随后这种方法得到迅速发展和不断完善。由于ELISA结合了免疫荧光法和放射免疫法两种技术的优点,具有选择性好、灵敏度高、结果判断客观准确、检测速度快、实用性强等特点,因而弥补了经典化学法和其他仪器法的不足,目前已广泛应用于临床医学和生物学等领域,在食品领域中应用相对较少,但随着食品安全问题日益受到社会各界的关注,它在食品安全分析中的研究和应用越来越多。为此本文就ELISA在食品安全分析中的应用作以如下评述,旨在促进该技术在食品安全分析领域中的发展。 1 酶联免疫吸附法概述 1. 1　原理　 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性[2]。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析[3]。 1.2　ELISA分类 ELISA方法的分类至今还没有一个统一的标准,最常用的测定方法有三类: 间接法测定抗原:(2)双抗体夹心法测抗原:(3)竞争法测抗原 1.3 与其他检测法相比的优势 目前用于食品安全检测的方法有很多，如薄层色谱(TLC)、微生物法、气相色谱(GC)、质谱(MS)、高效液相色谱(HPLC)、和核酸探针技术等。TLC 必须进行较为复杂的样品预处理和抽提，且不能定量，灵敏度低。微生物法不易筛选到特别敏感的菌株，也只能定性不能定量，易受其他抗菌药物的影响。GC 及 H P L C等虽灵敏度高，但设备昂贵，样品预处理复杂，检测费用高，难以推广使[4]，核酸探针则在实验过程中易受到污染。相比之下