2.1微生物的实验室培养1详解.pptVIP

一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 稀释涂布平板法 THANKYOU E-mail:1223wxj@163.com QQ:719455374 专题2 :微生物的培养与应用 课题1：微生物的实验室培养 了解有关微生物及培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。 一、课题目标： 掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。 无菌技术的操作。 二、课题重点和难点： 三、技能目标： 特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用. 微生物包括哪五类： 病毒 细菌 放线菌 真菌 原生动物 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 一、基础知识： (一)微生物 ：是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称． 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌. 菌落： 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 细菌的营养类型 根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。 自养菌:分类,举例? 异养菌: 腐生菌 寄生菌 大部分病原菌 光合自养型:光合细菌 化能自养型:硝化细菌,铁细菌,硫细菌 菌落 细菌的菌落特征因种而异 （二）培养基 培养基（培养液）是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 （1）按物理状态分：固体培养基和液体培养基、半固体培养基。 （2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。 （3）按成分分：天然培养基和合成培养基。 1.培养基的类型 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐、等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求． 4.培养基的用途 液体培养基：增菌、工业生产 固体培养基：纯化（分离），鉴定、活菌计数、保藏菌种 半固体培养基：观察微生物的运动、保藏菌种等 （三）无菌技术 1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。 2．三种常用灭菌方法 灭菌方法 适用材料或用具 灭菌条件 灭菌时间 灼烧灭菌 接种环、接种针或其他金属用具 酒精灯火焰的充分燃烧层 直至烧红 干热灭菌 玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等 干热灭菌箱内，160～170℃ 1～2h 高压蒸 汽灭菌 培养基等 100kPa,121℃ 15～30min 3.消毒和灭菌的区别 项目 概念 常用方法 应用的范围 消毒 使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 煮沸消毒法：在100℃煮沸5～6min 一般物品 巴氏消毒法：70～75℃煮30min或在80℃煮15min 一些不耐高温的液体，如牛奶 化学药剂消毒法 如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等 紫外线消毒法：30W紫外灯照射30min 接种室 项目 概念 常用方法 应用的范围 灭菌 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子) 灼烧灭