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2013年生物高考复习题选修部分
选修内容
基因工程
1(10浙江卷)2.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,下列操作错误的是用限制性核酸内切酶切割烟草茶叶病毒的核酸
用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
将重组DNA分子导入原生质体
用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞18.下列关于转基因植物的叙述。正确的是
A.转入到油菜的抗除草剂基因,可能通过花粉传人环境中
B.转抗虫基因的植物.不会导致昆虫群体抗性基因增加
C.动物的生长激素基因转人植物后不能表达
D.如转基因植物的外源基因来源于自然界,则不存在安全性问题
A过程①获取的目的基因,可用于基因工程和比目鱼基因组测序
B多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因,不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白,
C过程②构成的重组质粒缺乏标记基因,需要转入农杆菌才能进行筛选
D应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达
6(2011年浙江卷)6、ada(酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是
A. 每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒
B. 每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点
C. 每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada
D. 每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子
答案:C若选择同尾酶分别切割目的基因和质粒,再由DNA连接酶作用形成重组质粒,可能无法被限制性核酸内切酶识别。但实际上在构建重组质粒时,要求连接形成的“接点”序列,必须能被特定的限制性核酸内切酶识别、切割,以便回收插入质粒的目的基因。如出现目的基因不表达、表达水平过低或过高、表达产物的氨基酸序列差错等情况,需要回收目的基因,并进行加工修饰,最终使目的基因表达出人们所预期的效果。因此B选项正确。当然准确地说应该至少含有两个限制性核酸内切酶识别位点。
7(10江苏卷)27.(8分)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
(1)一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后,分别含有个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Srna Ⅰ切割,原因是。
(4)与只使用EcoR I相比较,使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止。
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入酶。
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
(4)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 (5)DNA连接
(6)鉴别和筛选含有目的基因的细胞 (7)蔗糖为唯一含碳营养物质
8(2011年安徽卷)31.(21分)Ⅱ.(9分)家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药。
(1)进行转基因操作前,需用___________酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞。
(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。
(3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改PCR反应体系的主要成分应该包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。
(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时,的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以_________________增加培养的细胞数量,也有利于空气交换。
答案:(1)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) (2)启动子 终止子 (3)TaqDNA聚合酶 对干扰素基因特异性的DNA引物对 (4)增大细胞贴壁生长的附着面积
9(11年北京卷)31.(16分)T-DNA可能随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植物形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代)。
(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除 ,因为后者产生的 会抑制侧芽的生长。
(2)为筛选出已转化的个体,需将T代播种在含 的
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