225-第十四章蛋白质和核酸.docVIP

第十四章 蛋白质和核酸 Ⅰ 学习要求 1. 了解氨基酸的分类、命名和理化性质，掌握氨基酸的两性性质、等电点及鉴别方法。 2. 了解肽的结构和蛋白质各种层次的结构及其主键和各种副键，掌握蛋白质的两性性质、呈色反应、沉淀与变性。 3. 了解核酸的分类和组成，掌握核苷、单核苷酸的结构特点。 Ⅱ 内容提要 一. 氨基酸的结构与主要性质 氨基酸是指组成蛋白质的α–氨基酸，在羧酸的α碳上连有氨基。氨基酸除了甘氨酸外都有旋光性，且构型为L型。  根据R的骨架，氨基酸可分为脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸和杂环族氨基酸三大类。根据酸碱性的不同，氨基酸又可分为酸性氨基酸、中性氨基酸和碱性氨基酸三种。 氨基酸具有羧酸和胺的共性，此外还具有一些特殊的性质。 1. 两性及等电点：氨基酸中有氨基和羧基，呈现两性，是内盐，属偶极离子（两性离子）。即可与酸反应，又可与碱反应。即  若将溶液调至碱性时，氨基酸主要以负离子的形式存在；调至酸性时，主要以正离子的形式存在。当氨基酸主要以两性离子的形式存在时，此时溶液的pH值叫做该氨基酸的等电点，用pI表示（也可用IP表示）。当pHpI时，氨基酸主要以负离子的形式存在，在电场中向正极移动；当pHpI时，氨基酸主要以正离子的形式存在，在电场中向负极移动；当pH=pI时，氨基酸主要以偶极离子的形式存在，此时，氨基酸的溶解度最小，在电场中不移动。利用该性质可分离氨基酸的混合物。 2. 显色反应：α–氨基酸与水合茚三酮反应生成蓝紫色物质，可用此性质区别于其他物质和其他类型的氨基酸。 二. 肽的结构 肽是聚酰胺类物质，结构特征是具有肽键：一分子氨基酸的氨基和另一分子氨基酸的羧基之间脱水形成的酰胺键称为肽键。由两个α–氨基酸形成的肽叫二肽，由三个α–氨基酸形成的肽叫三肽，以此类推分别叫四肽、五肽、六肽 ……。由多个α–氨基酸形成的肽链叫多肽。 测定多肽的组成是用酸性水解法，将所得的所有α–氨基酸用层析法分离；进行组成和含量分析。确定多肽分子中各氨基酸的排列次序，则常采用端基分析法。 三. 蛋白质的结构与性质 蛋白质的一级结构（初级结构）是各种α–氨基酸以一定的比例，按一定的顺序通过肽键连接而成的多肽链。蛋白质分子还具有二级、三级、四级等立体结构。蛋白质的立体结构是通过一些副键来维持的。这些副键主要有：氢键、二硫键、盐键、酯键和疏水键等。 由于蛋白质分子除肽链外，还有各种侧链，而这些侧链往往含有活泼的羧基、氨基、羟基、巯基和惰性的烃基等，这些基团有掩蔽在二、三级结构内部的，也有暴露在外面的。因此，蛋白质的性质与这些因素有关。 1. 两性性质和等电点：蛋白质分子中存在有各种酸性基团和碱性基团，所以蛋白质也有两性性质。在不同的pH值条件下，蛋白质可以正离子、负离子或偶极离子存在，当蛋白质以偶极离子存在时，溶液的pH值就是蛋白质的等电点。 2. 胶体性质：蛋白质分子属高分子化合物，其粒子处于胶体粒子的范围，具备了溶胶的性质。其稳定因素有二：一是蛋白质粒子表面形成了一层水化膜，二是在非等电点时蛋白质粒子带有同性电荷。 3. 沉淀：在蛋白质溶液中加入碱金属、碱土金属的中性盐或氨盐可使蛋白质发生沉淀，这种沉淀是可逆的，即加水后，沉淀又会溶解，蛋白质的性质不发生变化，这种沉淀也叫盐析。在蛋白质溶液中加入重金属盐或生物碱试剂，造成蛋白质不可逆沉淀。此时蛋白质的内部结构发生了较大的变化，失去了原有的性质。 4. 变性：高温、高压、高频震荡、高频辐射、酸、碱、有机溶剂、重金属离子等理化因素可使蛋白质的立体结构被破坏，性质也将改变，这叫蛋白质的变性。变性蛋白质失去一切生理活性。 沉淀不一定变性，变性也不一定沉淀；但不可逆沉淀，一定变性。 5. 水解：蛋白质可在酸、碱或酶的催化作用下水解，生成肽，最后水解产物是氨基酸。 6. 显色反应：蛋白质分子能与一些试剂作用生成有色物质。如在碱性条件下与硫酸酮溶液发生二缩脲反应，产生紫红色至蓝色物质；与米隆试剂（硝酸、亚硝酸、硝酸汞、亚硝酸汞的混合物）反应生成蛋白质汞盐的白色沉淀，加热后转变为暗红色；与浓硝酸共热呈黄色，再加入强碱颜色转深，称为黄蛋白反应；含硫的蛋白质与碱和醋酸铅共热，可产生黑色沉淀，称为胱氨酸反应；含色氨酸的蛋白质与乙醛酸混合，缓慢加浓硫酸，则会出现紫色环，称为色氨酸反应。 四. 核酸的结构组成 核酸是多聚核苷酸的简称，属酸性物质，存在于生物细胞中。核酸包括两大类：核糖核酸（RNA）和脱氧核糖核酸（DNA）。核酸是由核苷酸以磷酸二酯键连接起来的高分子化合物。核苷酸由碱基、核糖和磷酸组成。 在稀碱中，RNA可水解成四种含不同碱基的核糖核苷酸；用酶法可以将DNA水解成四种含不同碱基的脱氧核糖核苷酸。 核苷酸进一步水解得到核苷和磷酸，核苷由戊糖（核糖或2–脱氧核糖）和碱基组成。 核糖（或脱氧核糖）的1位