中药指纹图谱地研究技术(中华中医药学会).ppt

内 容 一、中药指纹图谱技术概述 2. 国内中药质量评价现状 植物学方法： 原植物鉴定，显微鉴定等 植物化学方法： 理化鉴定 分析化学方法： 仪器分析，色谱分析等 药理学方法： 生物鉴定法，生物等效等 分子生物学方法: DNA指纹鉴定 求职应注意的礼仪 求职时最礼貌的修饰是淡妆 面试时最关键的神情是郑重 无论站还是坐，不能摇动和抖动 对话时目光不能游弋不定 要控制小动作 不要为掩饰紧张情绪而散淡 最优雅的礼仪修养是体现自然 以一种修养面对两种结果 必须首先学会面对的一种结果----被拒绝 仍然感谢这次机会，因为被拒绝是面试后的两种结果之一。 被拒绝是招聘单位对我们综合考虑的结果，因为我们最关心的是自己什么地方与用人要求不一致，而不仅仅是面试中的表现。 不要欺骗自己，说“我本来就不想去”等等。 认真考虑是否有必要再做努力。 必须学会欣然面对的一种结果----被接纳 以具体的形式感谢招聘单位的接纳，如邮件、短信 考虑怎样使自己的知识能力更适应工作需要 把走进工作岗位当作职业生涯的重要的第一步，认真思考如何为以后的发展开好头。 Thank you 指纹图谱研究过程中的复杂样品的选择 有效组分的复方制剂 西洋参与淫羊藿 图9 上海制首乌指纹图谱 北京良方药业制首乌 北京金象药店制首乌 北京寿春堂药店制首乌指纹图谱 （6） 流动相（梯度表）的选择 主要影响因素 1. 起始浓度 2. 梯度速率 3. 流速 时间∕min 水%（H+/OH-）* 乙腈%* Ⅰ ? 0 100 0 55 20 80 60 0 100 Ⅱ ? 0 100 0 40 70 30 60 60 40 Ⅲ ? 0 80 20 40 60 40 60 50 50 Ⅳ ? 0 60 40 40 30 70 60 0 100 * 为体积百分比（V/V） 指纹图谱流动相梯度优化 * 为体积百分比（V/V） 梯 度 表 初始色谱条件 时间（min） 水%（H+/OH-） 乙腈% 0 100 0 60 0 100 时间（min） 水%（H+/OH-） 乙腈% 0 100 0 55 20 80 60 0 100 初始色谱条件的设定依据及目的 依据：化合物极性大小。如未知时，假设有效组分中包含各种极性的成分。 目的：快速确定主要或大部分化合物被洗脱时流动相的组成，为优化条件的选择提供依据。 优化条件的选择 选择依据：初始色谱图、梯度洗脱表及一定的经验 示 例：（1）淫羊藿总黄酮（40%）提取物 （2）钩藤总生物碱 （3）黄连药材 （4）知母总皂苷 淫羊藿提取物在初始条件下的色谱图 淫羊藿提取物第一次优化后的色谱图 梯度速率： 初始：100/60min=1.7 /min 优化：0~1.7 CH3CN% CH3CN% Min Min 初始条件 CH3CN% Min 三七 人参 西洋参 CH3CN% Min 起始浓度： 根据初始色谱图中主要色谱峰被 洗脱时的流动相组成，相应减少 ~20%。 流 速： 0.5~2.0 ml/min 2. 气 相 色 谱 法 （1）影响色谱峰分离程度的因素 色谱柱的类型 载气流速 起始柱温 升温速率 （2）研究示例 样品：广藿香油指纹图谱研究过程 方案设计 检测方法 （1）色谱方法 广藿香油为广藿香药材经水蒸汽蒸馏而得到的挥发油，均为易挥发组分，拟采用气相色谱法（GC）。 （2）仪器： Agilent 6890 GC （3）色谱柱的选择 可供选择的色谱柱：极性 非极性 中等极性 （4）进样方式的确定 手动 自动 顶空 2. 供试品溶液的制备 取广藿香油适量，加醋酸乙酯溶解，即得。 注：对于非极性毛细管色谱柱，如供试品溶液中含少量的少，最好干燥后进样。 2. 色谱条件的摸索 （1）对梯度速率及流速进行微调-由粗到精 初始条件 流 速： 3.0 ml/min 进样口温度： 250 ℃ 检测口温度： 280 ℃ 初 始 柱 温： 50 ℃ 升温 速 率： 30 ℃/min 第一次优化 流 速： 2.0 ml/min 进样口温度： 250 ℃