现代仪器检测程序.ppt

许学书 2006.11 绪 论 学习的意义： ①科学研究的眼睛，前沿科学的基础 ②监督食品安全的保障 ③对你寻找工作和进一步深造有帮助 学习目标： 要求能根据检测的目的、和被分析物的物理化学特性合理选择仪器、制定样品处理方案 本课程的特点 介绍生物工程、生物化学、食品科学研究中的分析仪器 实验室仪器的分类 ——按用途分 物理计量仪器:长度、重量、角度、电流、电导、电阻、热量、力、光等 化学分析仪器 生化仪器 环保仪器 微生物测量仪器 物理计量仪器 仪器的基本结构 进样系统：阀门 分离系统：色谱柱、毛细管、毛细管电泳等 动力系统：电源、泵等 检测器：二极管阵列、紫外、激光诱导荧光、电导、氢焰 计算机控制系统：自动进样等 信号放大转换系统：光信号转换为电信号、放大信号等 数据处理系统：软件 仪器的分类 按检测器分 光谱 紫外——可见光分光光度法 红外光谱法 激光诱导荧光——激光拉曼光谱法 化学发光——分子发光光度法 核磁共振波谱法 原子发射光谱法 原子吸收光谱法 X射线荧光光谱法 电子能谱法 质谱 电化学 热分析 样品的制备 ①破碎、均质：组织破碎机，均质机，超声仪，黏磨机，高压破碎机，气流破碎机 ②提取纯化：萃取（固液、液液、顶空），柱分离（分子排阻，离子交换，亲和），电泳，超速离心，高速离心， ③脱盐：透析，柱分离，超滤 ④浓缩：超滤，反渗透，真空浓缩，冷冻蒸发，氮吹 ⑤干燥：冷冻干燥，气流干燥 样品浓度、pH和离子浓度对分析结果的影响 用于样品处理的仪器举例 磁珠微粒处理器 全自动凝胶渗透色谱 (GPC )系统 KingFisher – 磁珠微粒处理器 KingFisher –磁珠微粒处理器的应用 癌细胞分离 重组蛋白纯化 从植物以及组织中纯化DNA Charite Hospital, Berlin: 癌细胞分离 从外周血内分离癌细胞 自动纯化组氨酸标记的重组蛋白 为KingFisher提供的第一种纯化蛋白的应用 Dynal Biotech合作共同开发 纯化包括 KingFisher mL 或 KingFisher 96 Dynabeads?TALON? 磁珠 基于 IMAC 化学技术 (Immobilized Metal Affinity Chormatography) KingFisher 重组蛋白纯化过程 KingFisher 96 纯化结果分析 KingFisher参与噬菌体展示实验 在噬菌体展示中使用磁珠的优势 提供快速有效的结合 由于结合表面增大，结合能力相应增加 改善了反应条件 可以用细胞悬液直接包被磁珠 磁珠可能被重复使用 特异性高 更少的非特异性结合 所需磁珠和噬菌体也较少 应用举例：免疫共沉淀反应 从植物组织中纯化DNA 生物科技公司: Rijk Zwaan, Netherlands 从种子和蔬菜中纯化DNA ，用于质量控制 完全的自动化：3台KF96, 机械臂, 液体处理系统, 多孔板栈架 每天纯化2000 个样品 为植物培植场和农业中心提供了快速的质控过程 从动物组织中纯化DNA 全自动凝胶渗透色谱 (GPC )系统 内容 原理 应用范围 特点 仪器配置 GPC 新的发展方向 总结 GPC样品净化理论基础 USEPA 3640A方法GPC 校准标样图 GPC在国际标准方法中的应用 USEPA（美国环保署） SW-846 (Method 3640A) AOAC Official Methods of Analysis (984.21) USEPA （美国环保署） Contract Lab Program USEPA （美国环保署） 625 (Sediment Cleanup) FDA （食品药物管理局） Pesticide Analytical Manual USDA （美国农业部） Food Safety Inspection Service GPC 的应用范围 食品作物：水果、蔬菜、肉类、谷类、饲料 生物样品：组织、尿液、血液 环境样品：烟气、土壤、沉淀物、矿石、危险废弃物 GPC 样品净化系统的特点 相对于其他吸附净化技术，样品损失低，重现性好 适用于大部分有机分析实验 降低了GC或GC/MS等分析设备的污染程度，延长了分析柱的寿命 有更低的检测限 GPC 样品净化系统 J2 AccuPrep MPS TM 控制系统（可编程控制软件） 自动进样 / 馏分收集系统 柱子 一体式溶剂输送泵 UV检测器 进样阀及柱切换阀 溶剂液位传感器 传统柱与高效柱 操作软件 设定样品序列 数据库管理色谱柱 具有软件诊断功能 样品序列编辑 EXCEL表式样品序列 方法菜单