传染与免疫分析.pptVIP

第十章  感染与免疫 本章主要内容 小 结 感染与微生物的致病性 天然免疫的组成: 生理屏障 细胞因素 抗原的种类 根据刺激机体B细胞产生抗体时是否须要T细胞辅助，分为胸腺依赖性抗原(Thymus dependen t antigen, TDAg)和非胸腺依赖性抗原(Thymus independent antigen，TIAg)。绝大多数天然抗原属于TD抗原。 根据抗原的化学性质可分为蛋白质抗原、多糖抗原、脂抗原、核酸抗原等。通常蛋白质是良好的完全抗原，而类脂质、寡糖、核酸的免疫原性很弱，只能成为半抗原。 根据抗原与机体的亲缘关系可分为异种抗原，同种异型抗原和自身抗原。 根据抗原的不同来源可分为天然抗原和人工合成抗原，天然抗原又可具体分为组织抗原、细菌抗原、病毒抗原等。各种病原微生物均为良好的抗原。 病毒表面结构蛋白抗原通常可以作为分类基础，如流感病毒的血凝素和神经氨酸酶。而病毒感染细胞后可表达一系列新抗原。 细菌的结构抗原包括表面抗原、鞭毛抗原、菌毛抗原、菌体抗原等，其代谢产物及分泌的外毒素均有强的免疫原性 CD8+T细胞介导的杀细胞效应 具有杀伤功能的T细胞称为细胞毒性T细胞(CTL或Tc)，是 MHCⅠ类限制的CD8+T细胞。 活化的CTL分泌一种穿孔蛋白(peforin)，与补体系统的组分C9 同功同源，可在Ca++存在下于带抗原的靶细胞膜上插入并聚合成孔，随后CTL分泌的颗粒酶通过此孔注入靶细胞内，引起靶细胞的蛋白与核酸降解，细胞死亡。 CD4+T细胞介导的免疫炎症 能够诱导免疫炎症的T细胞称为迟发型超敏反应(delayed type hypersensitivity, DTH)T细胞(TDTH,TD)，是MHCⅡ类限制的CD4+T细胞的一个亚类。 TD细胞经APC提呈的MHCⅡ+抗原肽活化后，大量分泌多种细胞因子。其中一些具有趋化因子和活化因子的功能，能吸引、活化更多的免疫细胞(如单核巨噬细胞、噬中性粒细胞、Tc等)到感染局部发挥各自的功能；另一些因子如肿瘤坏死因子有直接效应作用。。 第四节 免疫学技术 一、抗体的制备 1.血清抗体 用纯制的抗原多次接种于适当的成年健康动物，刺激其产生免疫应答，血清中含有大量特异性抗体。 天然抗原含有多种互不相同的抗原决定簇，因此血清抗体是具不同特异性的多克隆抗体混合物。 2.单克隆抗体 单克隆抗体是由单个B细胞增殖所产生的抗体，其遗传背景完全一致，因此抗体分子的氨基酸序列、类型、抗原特异性等生物学性状均相同。 3.基因工程抗体 嵌合抗体 单链抗体 重组抗体 抗体库与噬菌体抗体 二、免疫学技术 1.血清学技术 凝集反应 颗粒性抗原(细菌、血细胞等)与相应抗体在适量电解质环境中相互作用，经过一定时间出现肉眼可见凝集现象 。 沉淀反应 当可溶性抗原(蛋白质、多糖、类脂、血清、各种微生物培养液等)与相应抗体在电解质存在的适当条件下相遇，经过一定时间出现肉眼可见的沉淀现象 。 2.免疫标记技术 某些小分子物质结合到抗原或抗体上，不影响抗原抗体反应但使之更容易观察从而提高检测的灵敏度，称为免疫标记技术。与抗原或抗体结合的小分子物质称为标记剂。 免疫荧光技术(immunofluorescence technic) 放射免疫测定(radioimmunoassay,RIA) 免疫酶技术(immunoenzyme technic) 生物素-亲和素系统(biotin avidin system, BAS) 生物素是一种维生素H，亲和素是一种存在于卵清中的碱性糖蛋白，一个亲和素分子可与4个生物素分子稳定结合。 亲和素与生物素都可与蛋白质(包括抗原、抗体、酶等)、荧光素等分子结合而不影响后者的生物活性，是理想的标记剂。 免疫电子显微镜技术(immune electron microscopy) 将血清学标记技术与电子显微镜相结合，在免疫反应高度特异、敏感、快速、简便的基础上，用电子显微镜进行超微结构水平研究的一项技术。 其基本原理是用电子致密物质标记抗体。然后与含有相应抗原的生物标本反应，在电镜下观察到电子致密物质，从而准确地显示抗原所在位置 ，是一种在超微结构水平上的抗原定位方法。 免疫印迹(immunoblot或westernblot) 免疫印迹是在用于DNA分析的DNA印迹(Southern blot)技术基础上发展起来的蛋白质检测技术。 其原理是将SDS电泳的高分辨率与免疫 反应的高度特异性相结合。待测样品经SDS电泳分离后，转移到固相介质如醋酸纤维膜上，然后用标记抗体揭示特异抗原的存在。 本方法广泛用于蛋白质样品分析研究。 三、免疫预防 1.人工自动免疫(artifical active immunization) 全微生物疫苗