【骄子之路】2017高考生物一轮复习 第十单元 生物技术实践 专题34 微生物的培养与应用课件（选修1）.pptVIP

栏目导航 基础自主复习 一、微生物的培养 1．培养基 (1)概念：人们按照微生物对①_______________的不同需求，配制出的供其②_______________的营养基质。 2．无菌技术 3．微生物培养的基本技术 (1)配制培养基：称量→混合→溶化→调pH→分装→包扎。 (2)灭菌：加水→加培养基→密封→排冷气→维持压力→取出倒平板(或搁置斜面)。 二、微生物的利用 1．菌种保藏 2．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 考点分类透析 一、微生物的营养要素及培养基配方 基本营养要素：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。 名师提醒 (1)微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。 (2)对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源，又是氮源、能源。 (3)有些培养基不需要添加特殊营养物质，生物自己能合成，如大肠杆菌能合成某些维生素，作为特殊营养物质。 二、培养基的种类和用途 名师提醒 (1)加入培养基中的凝固剂(如琼脂)，一般不能被微生物利用，只起到凝固作用。 (2)选择培养基一般只生长具有特定特点的微生物，鉴别培养基可以存在其他微生物，而且能鉴别特定的微生物。 三、比较消毒和灭菌 四、微生物的纯化培养及菌种的保藏 1．原理 在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 2．纯化分离的方法一——平板划线法(如图) 3．纯化分离的方法二——稀释涂布平板法 Ⅰ.系列稀释操作(如图) Ⅱ.涂布平板操作如图所示 4．比较解读两种分离纯化方法 名师提醒 (1)两种接种方法作用不完全相同：平板划线法和涂布平板法都能使细菌纯化，但平板划线法不易分离出单个菌落，不能计数；涂布平板法能使单菌落分离，便于计数。 (2)涂布平板法的缺点：涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 一、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1．筛选菌株的原理 微生物的选择培养：在选择培养基的配方中，把尿素作为培养基中的唯一氮源，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 2．统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。 ②方法：用计数板计算。 ③缺点：不能区分死菌与活菌。 (2)间接计数法(活菌计数法) ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②操作： a．设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 b．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 ③计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。 二、分解纤维素的微生物的分离 1．纤维素酶 纤维素酶是一种复合酶，它包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，具有催化分解纤维素的作用，其作用过程如下： 2．纤维素分解菌的筛选原理 3．土壤中纤维素分解菌的筛选流程 土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落。 名师提醒 (1)分离微生物所用的选择培养基一定是固体培养基，因为菌落只能在固体培养基上形成。 (2)平板划线法只适合用于微生物的提纯，不适合进行计数，并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯。 (3)分离能分解纤维素的微生物时，有时需要进行选择培养，选择培养的目的是增大选择对象在样液中的浓度，以确保用刚果红染色法鉴别时确实能得到所需菌种。 培养基的制备、高压蒸汽灭菌、微生物的分离、纯化和培养过程及菌液划线分离与涂布分离法是近几年高考的热点与焦点所在；微生物的分离、计数与鉴定是微生物技术领域的重点内容之一，它广泛应用于食品加工，微生物污染测定等行业具有重要实践价值，相关内容在近年高考中多有体现，预计2016年高考仍会呈现，题型多为非选择题。 热点题型讲练 (2015年江苏卷)做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是(　　) A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖 B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上 【解析】　本题考查微生物的实验室培养与分离的相关知识，意在考查考生的理解分析能力及实验操作能力，难度中等。高压灭菌加热结束时，当压力表的压力降到零时，打开放气阀，打开盖子，如果提前打开放气阀，