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实 验 一
血液一般检验(一)General Examination of Blood
【内容】
1、皮肤采血法(毛细血管采血法)
2、血红蛋白(微量)吸管
3、静脉采血法
4、血红蛋白测定
5、红细胞计数
6、细胞计数池的正、侧面观察
7、正常及异常红细胞形态(示教)
【目的要求】
掌握红细胞直接计数,血红蛋白测定的标本送检要求、原理、操作方法、参考值及临床意义。
2、掌握皮肤采血法(毛细血管采血法)及血红蛋白(微量)吸管的使用方法。
3、熟悉静脉采血(collection of venous blood)的方法和无菌操作技术。
4、熟悉细胞计数池的结构及应用范围。
【器材】
721-型分光光度计,血细胞计数板,血红蛋白吸管,75%酒精棉球及干棉球,三棱针,玻棒及试管,显微镜。
【试剂】
1、HicN试剂的配制
氰化钾 50mg
高铁氰化钾 200mg
无水磷酸二氢钾 140mg
Triton×—100 1.0ml
蒸馏水 加至1000ml,纠正pH至7.0-7.4。
此液为淡黄色透明溶液,贮存在棕色有塞玻璃瓶中,放40C冰箱保存,一般可用数月。
2、赫姆(Hayem)液:
氯化钠 1.0g
结晶硫酸钠(Na2S04·10H20)5.0g(或无水硫酸钠2.5g)
氯化高汞 0.5g
蒸馏水加至200ml
溶解后加20g/L伊红水溶液1滴,过滤后用。
【实验】
一、皮肤采血法(毛细血管采血法)
【器材】
1、三棱针,预先高压消毒,每人每次采血更换1次性采血针以避免交叉感染。
2、消毒干棉球。
3、75%乙醇棉球
4、20u1吸管
【操作方法】
1、采血部位以左手无名指为宜。
2、轻轻按摩采血部位,使其自然充血,用75%乙醇棉球消毒局部皮肤,待干。
3、紧捏刺血部位,用无菌刺血针迅速刺入皮肤约2—3mm,让血液自然流出,如血液不流出可在其周围轻轻加压,但不要过重。
4、用干棉球擦去第一滴血、按需要依次采血。
5、采血完毕,用干棉球压住伤口,止血片刻。
6、血红蛋白吸管的使用:在采血前首先练习一下吸管使用,使其达到得心应手。
二、 血红蛋白(微量)吸管的使用
【原理】 挤压乳胶吸头,使刻度微量吸管内产生负压而吸取液体。
【器材】
微量吸管、乳胶吸头、干脱脂棉。
试管、试管架。
2ml吸管、吸耳球。
【试剂】
洗涤液3管(蒸馏水、95%乙醇、乙醚)。
生理盐水。
【操作方法】
准备吸管及试管 将乳胶吸头套在微量吸管上,注意两者连接处应严密不漏气。试管上应贴上患者姓名或门诊/住院号标签。
加稀释液 取试管1支,加生理盐水2ml。
持管吸血 右手拇指和中指夹住吸管与吸头交接处,示指盖住吸头小孔。三指轻微用力,排出适量的气体使管内形成负压。将管尖插入抗凝血,三指慢慢松开,吸取抗凝血到所需刻度后抬起示指。注意吸血时管尖始终不要离开液面,以免吸入气泡;也不要用力过度,将血液吸入乳胶吸头内。
拭净余血 用干脱脂棉沿吸管口方向拭净余血,并检查血量是否达到规定刻度。
释放血液 将吸管插入含生理盐水的试管底部,慢慢排出吸管内的血液,再用上清液冲洗管内余血3次,最后将管内残余液体完全排净。
洗涤试管 依次用蒸馏水洗净,95%(V/V)乙醇脱水,乙醚干燥。如为一次性微量吸管,可省略该步骤。
【注意事项】
准备吸管 吸管和胶吸头连接处应严密不漏气,挤压吸头力度应适宜。
持管吸血 吸血时动作宜慢,防止血液吸入乳胶吸头内;避免产生气泡。
3. 拭净余血 吸血后拭净管外余血以保证血量准确。
三、静脉采血法
【原理】 使用注射器或负压采血器刺入浅静脉后,用负压吸取所需血量。
【器材】
消毒棉签。
压脉带(止血带)2~3mm口径的橡皮软管。
一次性消毒注射器
针头:30~40mm长,18号、19号、20号带斜面。若采集5岁以下儿童的血液标本,使用23号或25号针。
注射器:可选用2ml、5ml、10ml或20ml注射器。
一次性负压采血器。
试管 含或不含抗凝剂,并应有采血量的标记(如5ml刻度)。
垫枕。
【试剂】
30g/L碘酊、75%(V/V)乙醇或碘伏。
抗凝剂(根据实验项目选择所需的抗凝剂)。
【操作方法】
准备试管 仔细阅读受检者申请单,决定采血量,准备每个试验所需的试管,并应按一定顺序排列,如患者仅做凝血试验一项,最初1ml血液必须丢弃。如做红细胞沉降率测定,需取试管1支,加入适量抗凝剂(109mmol/L 枸橼酸钠0.4ml)
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