转录后加工.docVIP

课程名称___生物化学________ 授课题目 基因的转录、转录后加工及逆转录 授课日期 授课班级 授课时数 4 授课方式 理论课 授 课 重 点 、 难 点 转录与复制的异同点 参与转录的酶 转录过程（原核生物转录起始、真核生物RNA聚合酶II催化转录的起始） 转录终止中的两种方式 真核生物的转录后加工 逆转录现象与逆转录酶 授 课 内 容 、 教 具 与 时 间 分 配 转录与复制的异同点 0.5学时 第一节　　　参与转录的酶类 （ 1.0学时 ） RNA聚合酶（DNA依赖的RNA聚合酶） 　 （0.4学时） 作用条件： 1. 4种NTP 2. Mg2+或Mn2+ 3. DNA模板 4. 5’→3’方向，不需要引物 原核生物的RNA聚合酶 　（ 0.4学时） 1.核心酶α2ββ?和全酶α2ββ?σ亚基组成 2.各个亚基的功能 真核生物的RNA聚合酶 　（0.2学时） 三种类型RNA聚合酶I、 II 、III、 各自所在部位、转录产物、以及对鹅膏蕈碱敏感度。 第二节 　　转录过程 　　　　（2 学时） 起始、延长、终止三步 一、起始 原核生物 （0.15学时） 1.几个概念 反义链/-链/模板链(antisense/-/template strand) 有意义链/+/密码链(sense/+/coding strand) 2.启动子（Promoter）的定义与结构 （0.15学时） -10 sequence(Pribnow box): TATAAT -35 sequence: TTGACA 3.起始的发生 （0.２学时） 首先，闭合的启动子复合物( closed promoter complex ) 和开放的启动子复合体(open promoter complex) 的形成。 然后，RNA的合成。 合成的特点： (1)5’端第一个核苷酸往往是pppG或pppA (2)不需引物 (3)合成方向，5’→3’方向。 第___1___页 授 课 内 容 、 教 具 与 时 间 分 配 4.待转录基因的选择与转录的进行方向 （0.1学时） 真核生物 （0.5学时） 1.启动子结构 TATA/Hogness Box、 GC box、 CAAT box; enhancer 2. RNA聚合酶II催化转录起始的过程及与原核转录起始的不同点，各转录因子的作用。 2. 参与作用元件 顺式作用元件和反式作用因子cis-acting elements, transacting/ transcriptional factors 二、延长 （0.3学时） 过程： σ亚基脱落，核心酶构象发生变化，并沿模板链3’→5’方向快速滑动，同时转录产物沿5 ’→3’方向延长。 概念：转录泡(transcription bubble)结构的组成。 三、终止 （0.4学时） ρ因子： 一种蛋白质，由六个亚基组成的六聚体，具有ATP酶活性能与单链RNA结合，但不能与DNA双链或RNA?DNA杂和双链结合。 依赖ρ因子的终止： 不依赖ρ因子的终止： 在DNA模板含有终止信号（回文结构），因此转录出来的RNA能自身互补形成发夹结构，在发夹的3’尾端有4个或更多的U。RNA聚合酶遇到这种发夹结构即停止工作。 由于含有连续多个微弱的U-A碱基对，因而新生的RNA即自模板分理出。 四、转录的抑制剂 （0.2学时） （一）与DNA模板作用的转录抑制剂 放线菌素D （二）与RNA聚合酶作用的转录抑制剂 利福平 / 利福霉素 鹅膏蕈碱 真核生物的转录后加工 　　　0.5学时） 一、 mRNA的转录后加工 　（0.3 学时） 1. 加帽：5’端加mGpppG……三磷酸双鸟苷 2. 加尾：3’端poly A 尾巴 3. mRNA前体的