专题2 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数.pptxVIP

专题2微生物的培养和应用;内容纲要;课题背景;（1）自然界中目的菌株筛选的依据是根据它对 的要求，到相应的环境中去寻找。 （2）实验室中微生物筛选的原理： 人为提供有利于 生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时 或 其他微生物生长。;选择培养基： 允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 菌株： 纯且活状态所保存的菌种 。;研究思路;（二）统计菌落数目： 1、活体计数法（稀释涂布平板） （1）操作方法： 稀释涂布平板→统计菌落数 （2）原理： 1个菌落→1个活菌 ;（二）统计菌落数目： 1、活体计数法（稀释涂布平板） （3）统计原则 ①选 30～300 个菌落的平板统计 ②每个稀释度取3个平板取其平均值;例：两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。 1、甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230。 2、乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。 你认为这两位同学的作法正确吗？如果有问题，错在哪？;研究思路;2、显微镜直接计数;研究思路;研究思路;实验过程;实验过程;（三）微生物的培养与观察 1、接种：用适当的稀释液作涂布平板 2、培养：细菌：30～37℃，1～2d; 放线菌:25～28℃, 5～7d; 霉菌: 25～28℃, 3～4d. 3、观察：a.每24h统计一次菌落数目 b.以“稳定菌落”为观察对象;（四）鉴定：筛选后必鉴定 鉴别培养基：不影响微生物的生存 酚红培养基： 鉴定分解尿素的细菌。 原理：脲酶催化尿素分解成氨→培养基碱性增强→ 酚红变红→脲酶阳性;(1)作样品系列稀释液 (2)用适当的稀释液涂布平板; 在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），同种微生物表现出相同而稳定的菌落特征。;内容;特别提示　(1)不同细菌的菌落在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面的特征不同，可以作为菌种鉴定的重要依据。 (2)进行活菌计数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 (3)选择培养基一般只生长具有特定代谢特性的微生物，鉴别培养基可以存在其他微生物，而且能鉴别特定的微生物。;【例1】 尿素是一种重要的农业肥料，但若不经过细菌分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。请分析回答问题。;(1)培养基中加入尿素的目的是筛选________，这种培养基属于________培养基。 ; (2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的_______和_____，实验需要振荡培养，原因是______________。 (3)转为固体培养基时，常采用________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。 (4)下列材料或用具：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管；③实验操作者的双手。其中需要灭菌的是________；需要消毒的是________。(填序号);(5)在进行分离分解尿素的细菌的实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只筛选出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有______。(填序号) ①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照 思维导图：;深度剖析　(1)培养基中加入尿素的目的是筛选尿素细菌。 (2)尿素可为尿素细菌提供氮源，震荡可为目的菌株提供氧气。 (3)在固体培养基中接种常用稀释涂布平板法和平板划线法。 (4)操作器械需灭菌，操作者双手需消毒。 (5)土样不同、培养基污染、操作失误均可能导致计数误差。 答案　(1)目的菌　选择 (2)尿素　葡萄糖　为目的菌提供氧气 (3)稀释涂布平板(平板划线) (4)①和②　③　(5)①②③;[思维拓展](1)利用选择培养基设计实验分离纯化微生物。 ①真菌：用含青霉素的培养基分离。 ②金黄色葡萄球菌：用含高浓度食盐水的培养基分离。 ③固氮微生物：用无氮培养基分离。 ④自养型微生物：用含无机碳源的培养基分离。 ⑤光合细菌：用含无机碳源的培养基在无氧而有光照