紫外吸收光谱法分析应用.ppt

测定浓度的选择 溶液吸光度值在0.2-0.8范围内误差小(A=0.434时误差最小)，因此可根据样品的摩尔吸光系数确定最佳浓度。 即吸光度A=0.4343时，吸光度测量误差最小。将吸光度值控制在0.2-0.8之间，光度测量误差较小。 三、测量误差 只有当 则 测量误差最小，此时 - logT = log e = 0.434 = A 即吸光度为0.434时，浓度测量才具有最小相对误差。 一、络和物组成的测定 摩尔比法 等摩尔系列法 斜率比法 平衡移动法 应 用 摩尔比率法测定络和比： mM+nR MmRn 配制：不同CR/CM的系列溶液：如CR/CM=1，2，3，……n 分别测吸光度：A1, A2 ,A3……An, 作A~ CR/CM曲线 摩尔比法 设有络合反应mM + nY = MmYn，固定一个组分(如M)的浓度不变，改变另一组分(如Y)的浓度，求得一系列[Y]/[M]比，在络合物MmYn的最大吸收波长处测定吸光度的变化。则开始时，随[Y]/[M]的增加，溶液吸光度线性增加，到达络合物的组成比后，继续增加[Y]/[M]，会有三种不同情况： 吸光度达到饱和，不再增加。说明试剂Y无吸收，吸光度的增加只是络合物的单独贡献。如Fe(III)-钛铁试剂络合物。 吸光度出现一转折点后继续增加。说明试剂Y在络合物的lmax处稍有吸收。如Zn-PAN络合物。PAN：1-(2-吡啶基偶氮)-2-萘酚。 吸光度出现一转折点后呈直线下降。说明分步生成了摩尔吸光系数小于络合物e的高次络合物。如Bi-二甲酚橙络合物。 图代表了第一种情况。曲线转折点对应的摩尔浓度比[Y]/[M] = n:m，即为该络合物的组成比。 摩尔比法测定络合物的组成比。 若络合物稳定性差，络合物解离使吸光度下降，转折不明显，据此可以测定络合物不稳定常数。 设：络合物解离度为 ?，不解离时转折处浓度为 C CMmRn = (1- ?)C CM = m ? C CR = n ? C 则络合物不稳定常数为 ? = A0 - A’ A0 K = [CM]m[CR]n (m ?C)m(n ?C)n mmnn ?m+n Cm+n-1 [CMmCRn] (1- ?)C 1- ? = = 二、酸碱离解常数的测定 HB H++B- Ka = [H+] [B-] [HB] (1) pKa=pH+lg [HB] [B-] 设：b=1cm A=A HB +AB- A=?HB（c- [B-]) +?B-[B-] = ?HBc+[B-] (?B-- ?HB) 同样由（2）得： A=?HB[HB]+ ?B-(c-[HB]) = ?B-c+[HB] (?HB- ?B-) [B-] = ?HB A -?HB c ?B-- 则：A=A HB +AB-=?HB[HB]+ ?B-[B-] (2) ?[HB]= ?B-c-A ?B-- ?HB (3) (4) 将（3）（4）代入（1）中： Ka = [H+] [B-] [HB] C=[HB]+[B-] Ka= [H+](A -?HB c) ?B-c-A A HB = ?HB c AB-= ?B-c 定义： ? A -AHB Ka= [H+] AB--A pKa=pH+lg A -AHB AB--A 第五节 分光光度测定方法 普通分光光度法 示差分光光度法 双波长分光光度法 导数分光光度法 一、普通分光光度法 以一定的标准溶液滴定待测物溶液，测定滴定中溶液的吸光度变化，通过作图法求得滴定终点，从而计算待测组分含量的方法称为分光光度滴定。 一般有直接滴定法和间接滴定法两种。前者选择被滴定物、滴定剂或反应生成物之一摩尔吸光系数最大的物质的lmax为吸收波长进行滴定。滴定曲线有如下几种形式。间接滴定法需使用指示剂。 ? 光度滴定与通过指示剂颜色变化用肉眼确定滴定终点的普通滴定法相比，准确性、精密度及灵敏度都要高。光度滴定已用于酸碱滴定、氧化还原滴定、沉淀滴定和络合滴定。 1.分光光度滴定 A = ? b c 吸收定律 二、吸收定律的适用性与限制 1、吸收定律具有加和性，即 特别是存在非吸收线(或吸收很小,杂散光)和浓度较大时，I变得 很小。 I i = 常数 吸收定律或比尔定律，其成立条件是待测物为均一的稀溶液、气体等，无溶质、溶剂及悬浊物引起的散射；入射光为单色平行光。 比尔定律在有化学因素影响时不成立。 解离、缔合、生成络合物或溶剂化等会对比尔定律产生偏离。 比尔定律在有仪器因素影响时也不成立。非单色光对比尔定律产生偏离。杂散光(非吸收光)也会对比尔定律产生影响。 其他影响因素包括溶剂、光效应等也应考虑。 三、紫外-可见吸收光谱的灵敏度