植物细胞悬浮培养技术资料.pptVIP

操作注意事项： 对悬浮培养细胞继代时，进液口的孔径要小，只能通过单细胞或小细胞团（2～4细胞），使用吸管或注射器。 继代前，培养容器静置短时间，大细胞团沉降，再吸上层悬浮液。依此，多次，可建立良好的细胞悬浮培养物。 2.2.2 连续培养（Continuous culture） 加入培养基 排出培养基及其培养物 二者体积相等 分：开放式连续培养 封闭式连续培养 开放式和封闭式区别 封闭式中：排出液中的细胞用机械方法收集后，又放入原培养基，所以其培养细胞数目不断增加； 开放式中：在注入新鲜培养基的同时，培养细胞随同培养液一起流出 。 连续培养意义： 1.植物细胞代谢调节的研究 2.某种生长限制因子对细胞生长的影响 3.次生产物的大量生产 紫杉醇是获得美国FDA(1992)认证的优良抗肿瘤药物。红豆杉树皮中紫杉醇的含量为万分之二，其在国际市场上售价为20万美元/kg 3 由悬浮细胞再生植株的途径 由悬浮细胞直接形成体细胞胚 先将悬浮细胞在半固体培养基上诱导形成愈伤组织，然后再由愈伤组织分化植株 3.1 悬浮培养对培养基的要求 能用来建立生长快、易散碎的愈伤组织的培养基，一般也适用于建立该物种的悬浮培养。 在活跃生长的悬浮培养物中，无机磷酸盐的消耗很快，不久成为限制因子。要及时继代。 Noguchi等(1