第二章代谢调节3详解.pptVIP

转录前起始复合物（PIC）的形成 2.1.2.1.3 顺式作用元件（cis-acting elements） 是指真核生物基因组中参与调控自身DNA链内结构基因转录活性的特异碱基序列(调控序列) 。 启动子（promoter） 增强子(enhancer) 沉默子(silencer) GGGCGG TATAAT CAAT -60?100bp -40?60bp -25?30bp 启动子 结构基因 编码链（＋） 模板链（-） 5 转录起始点 （＋1） 增强子 3 根据顺式作用元件的作用和位置 又有 35 （1）启动子 位于转录起始点上游，能被RNApolⅡ识别、结合，启动转录的 一段碱基序列。常有特殊的共有序列： （2）增强子 是增强启动子转录活性的特异碱基序列。 （远离转录起始点，位置灵活，其作用与方向、距离无关） （3） 沉默子 对基因转录起阻遏作用的特异碱基序列，属于负性调控元件。 共有碱基序列——TATA盒、GC盒、CAAT盒等 TATA盒（核心序列）——是TFⅡD和RNA PolⅡ结合位点 34 ① 启动子作用前，需要与通用转录因子、RNApolⅡ结合 外，还需其他多种调节蛋白的参与。 ② 增强子必须与特异调节蛋白结合后，才能发挥转录增强 作用。根据作用性质，又分： 順式作用元件都必须与相应调节蛋白结合后，才能发挥 转录调节作用。 注意： 组织特异性增强子——受特异调节蛋白调节 诱导性增强子——受激素或细胞因子诱导而产生的调节蛋白 ③ 沉默子的负性调控，也必须与特异调节蛋白结合后才能发挥 调节作用。 顺式作用元件（启动子、增强子、沉默子的调控作用，均需相应的转录调节蛋白的参与。） CAAT盒 GC 盒 TAAT盒 （＋1 ） promoter 2.1.2.1.4 反式作用因子（ trans-acting factor） 能直接或间接与顺式作用元件相互作用，进而调控特异 基因转录的一类调节蛋白, 或称转录调节蛋白、转录因子 （transcription factor, TF）。 按其功能不同，常分以下两大类： 基本转录因子 特异转录因子 转录抑制因子——与沉默子结合 转录激活因子——与增强子结合 ——指参与形成PIC的TFⅡ类调节蛋白 DNA结合域（DNA binding domain, DBD） 转录激活域（activating domain, AD） 锌指（zinc finger）结构 DNA结合域(DBD) 亮氨酸拉链（Leu zipper）结构 螺旋－转角－螺旋（helix-turn-helix, HTH） 转录激活域（AD）——控制转录起始复合物的形成,并激活 转录活性(富含酸性aa区、Gln区和Pro区) 转录因子两个重要的功能结构域 形成同源或异源二聚体， 增强与DNA结合力。 常有两个或两个以上锌指结构，利于插入DNA双螺旋的深沟并与之结合 锌 指 结 构 亮氨酸拉链结构 LDL-R基因的表达，需要TFII类转录因子、RNA Pol II、多种转录因子的协同作用 2.1.2.1.5 反义RNA(antisense RNA) Mizuno and Simons(1983年)发现: 能够通过碱基互补与细胞内同源mRNA（为正义RNA）结合，从而抑制mRNA翻译为蛋白质的RNA，称反义RNA。 1995年复旦大学Shu Guo博士在美国康奈尔大学实验： 结果：两组线虫体内的par-1基因表达均被抑制 反义RNA注入线虫体内→以阻断par-1基因表达 正义RNA注入线虫体内（作对照）→期待观察到增强效果 华盛顿卡内基研究院Fire A博士注意到，Guo博士研究结果已经不能单用反义RNA技术来解释了，推测可能还有其它的成分参与了这一过程。 纯化的反义RNA 纯化的正义RNA ds