第13章DNA的生物合成——复制 Microsoft PowerPoint 演示文稿.pptVIP

人类的基因 约3.5万个。 基因分类： 结构基因：编码蛋白质 1% 调节基因：调节基因表达。 插入序列、重复序列： 中心法则（1958年） 1.以DNA为模板指导合成DNA的过程 复制 甲流病毒结构图片 第一节 复制的基本规律 一、半保留复制 (semiconservative replication) 二、双向复制 (bidirectional replication) 三、半不连续复制 (semi-discontinuous replication) 一 、半保留复制 1.概念：DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板，按碱基配对规律，合成与模板互补的子链。 子代细胞的DNA，一股单链从亲代完整接受过来，另一股单链是新合成的，两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致，这种复制方式为半保留复制。 2. 实验依据： 密度梯度实验 （Meselson and Stahl） 1957年，梅塞尔和斯塔尔在加州工学院工作期间，利用大肠杆菌研究遗传物质DNA。他们先将大肠杆菌放入含有N15的培养基中标培养，然后将这些大肠杆菌转移到N14的培养基中培养，最后把大肠杆菌经密度梯度离心。他们发现提取的DNA有三条带。 电镜观察DNA复制 二、 双向复制(bidirectional replication) 原核生物复制时，DNA从起始点(origin)向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制。 真核生物每个染色体有多个起始点，是多复制子的复制。 习惯上把两个相邻起始点之间的距离定为一个复制子(replicon) 。复制子是独立完成复制的功能单位。 人类约1000个bp即有1个复制起点。 第二节 参与DNA复制的 主要酶类和蛋白因子 聚合反应的特点 DNA 新链生成需引物和模板； 新链的延长只可沿5? → 3?方向进行 。 三、参与DNA复制的酶类 1、解螺旋酶(helicase) ——利用ATP供能，作用于氢键，使DNA双链解开成为两条单链。 2、单链DNA结合蛋白(single stranded DNA binding protein, SSB) ——复制中维持模板处于单链状态并保护单链完整 （1） 拓扑一词的含义是指物体或图象做弹性移位而又保持物体不变的性质。 DNA 分子中存在打结，缠绕、连环的现象。 DNA拓扑异构酶动画.mov Topo酶：切割DNA链，使其松弛后再连接 Topo酶：切割DNA链，使其松弛后再连接 5、DNA聚合酶 全称：依赖DNA的DNA聚合酶 (DNA-dependent DNA polymerase) 简称：DNA-pol DNA聚合酶的特点： 1.底物是dNTP。有高度亲和力。 2.催化3’-5‘磷酸二酯键。 3.不可以使两个游离的单核苷酸形成3’-5‘磷酸二酯键。 4.催化子链与母链之间以碱基互补的形式形成氢键。 5.外切酶的活性。 美国生物化学家 美国斯坦福大学结构生物学教授2006年，因对“真核转录的分子基础所作的研究”，独享诺贝尔化学奖。 αεθ为核心酶： α：5′→3′聚合活性 ε：3′→5′外切酶活性 （辨别碱基） θ：维系αε二聚体作用 第三节 DNA的复制过程 一、原核生物的DNA生物合成 反向重复序列 复制叉----DNA双链解开分成两股，各自作为模板进行复制，形成在显微镜下可看到的叉状结构。 （3） 起始的过程 随从链：复制方向与解链方向相反，为不连续复制，这股不连续复制的链称为随从链。 复制中位于随从链上的不连续片段称为岡崎片段(okazaki fragment)。 岡崎片段的大小： 真核生物：100~135bp 原核生物：1000~2000bp DNA复制.mov ? 细胞能否分裂，决定于进入S期及M期这两个关键点。G1→S及G2→M的调节，与蛋白激酶活性有关。 ? 蛋白激酶通过磷酸化激活或抑制各种复制因子而实施调控作用。 ?多复制子 复制子(replicon)：相邻两个复制起点之间的距离。复制子是独立完成复制的功能单位。复制有时序性，即复制子以分组方式激活而不是同步起动。 参与者： DNA-pol α (引物酶活性) pol δ (聚合酶、解螺旋酶活性) 拓扑酶 复制因子 (replication factor, RF) 增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear