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1、培养基：按物理状态分为 固体 和 液体 培养基，其中 固体 培养基需加琼脂；按用途分为 选择 和 鉴别 培养基。 2、菌落：所用培养基是 固体 （物理状态分），所属生命系统层次 种群 。 3、微生物的营养包括那几类： 4、培养乳酸菌时需要在培养基中添加 维生素 ，乳酸菌在细胞结构上与酵母菌的本质区别是 有无核膜包被的真正的细胞核，新陈代谢类型是 异养需氧型 。 5、培养霉菌时需将培养基的PH调到 酸性 ，培养细菌时需将培养基的PH调到 中性或微碱性 ，培养厌氧细菌时需要提供 无氧 条件。 6、获得纯净培养物（目的微生物）的关键----防止外来杂菌的入侵，在无菌技术中常用的消毒方法及对象有哪些？常用的灭菌方法及对象有哪些？如对培养基应选择什么方法？ 消毒方法：1.煮沸消毒法2.巴氏消毒法3.使用化学药剂消毒:用75%的酒精擦拭双手 灭菌法：1灼烧灭菌：微生物的接种工具，如：接种环 接种针 2.干热灭菌：能耐高温的 需要保持干燥的物品，如:玻璃器皿吸管.培养皿等 3高压蒸汽灭菌:培养基及一些仪器 7、制备培养基的过程：计算 称量 溶化 灭菌 倒平板 8、平板倒置的原因：1防止皿盖皿盖冷却水倒流入培养基污染培养基2.使培养基保持一定湿度 9、大肠杆菌：细胞类型？鉴别方法？ 异养兼性厌氧型 伊红美蓝溶液：菌落呈深紫色并带金属光泽 10、常用接种方法：18页 接种方法名称 平板划线法 稀释涂布平板法 概念 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 最终目的 形成由单个细胞繁殖而来的菌落 形成由单个细胞繁殖而来的菌落 过程 操作关键 连续划线 划完灭菌 稀释度足够高 应用 ------------ 统计菌落的数目 对照设置 菌液和无菌水 前后自身对照 11、菌种保藏方法： 临时保藏 法（温度 4℃ ）， 甘油管藏 法（温度 20 ℃ ） 12、土壤中的一些细菌因为能合成 脲 酶而能分解尿素，反应式： CO(NH2)2+H2O----CO2+2NH3 分离土壤中能分解尿素的细菌用 选择 培养基（用途），氮源 尿素（唯一的），主要的碳源是 葡萄糖 。对分离土壤中能分解尿素的细菌的鉴别方法： 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，指示剂变为红色。 13、测定微生物数量最常用的方法 活菌计数法 ，特点 统计的是活菌数 关键是 稀释度足够高，计数方法是在菌落数稳定时，选择菌落数在 30-300 的平板计数，至少对 3 个平板进行重复计算求平均值，至少 3 个平板的菌落数接近才能说明稀释操作比较成功。计算公式是 C*M/V ；另外一种常用的方法是 显微镜直接计数法 ，其特点是 统计的是全部菌落 。 14、目的菌的分离：24页 目的菌 稀释倍数 培养温度 培养时间 细菌 104 105 106 30-37℃ 1-2d 放线菌 103 104 105 25-28℃ 5-7d 真菌 102 103 104 25-28℃ 3-4d 15、果胶的基本单位是 半乳糖醛酸 ，分布在 植物细胞壁及胞间层 ； 果胶酶的种类有 多聚半乳糖醛酸酶 果胶分解酶 果胶酯酶 。 16、酶活性的表示方法 单位时间内.单位体积中反应物的减少量 及 产物的增加量 影响酶活性的因素有 温度 、 ph 、 酶的抑制剂 17、探究温度和PH多酶活性的影响：实验步骤，因变量？ 1搅拌器搅拌苹果泥 2将分别装有苹果泥和果胶酶的试管在恒温水浴中保温 3加入果胶酶反应一段时间 4过滤果汁 18、胡萝卜素： 分类，应用，性质，分布； 提取方法，步骤，试剂； 鉴别方法，试剂，对照设计，结果分析； 注意事项：干燥温度、时间、？温度不能太高，干燥时间不能太长。为什么？温度太高，干燥时间太长会导致胡萝卜素分解。干燥方法？烘箱.热风吹 萃取温度、时间、加热方法？为什么？冷凝装置的用途？温度高时间长，水浴加热。有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃.爆炸。 滤纸的两边不能 接触 点样操作的要求？ 点样应快速.细致，注意保持滤纸干燥。 19、果酒、果醋制作的比较： 果酒制作 果醋制作 菌种 菌种名称 酵母菌 醋酸菌 生长条件 及分布 糖度高的环境 土壤 酸性 变酸的酒面 来源 葡萄 变酸的酒面 结构特点 真核 原核 生殖方式 有性和无性 无性 代谢类型 异养兼