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一、全能性 1、概念: 已分化的细胞在一定条件下,具有发育成完整个体的潜能。 2、活细胞具有全能性的原因: 生物体的每一个活细胞都含有该物种全套的遗传信息 3、全能性表达的条件: 离体、营养物质、激素、适宜的条件 动物细胞培养和核移植技术 3、动物细胞培养过程中几个重要的概念 1. 细胞贴壁: 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上(单层)。要求:培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 2. 接触抑制: 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。 1、无菌、无毒的环境 (添加一定量的抗生素,定期更换培养液) 2、营养 (葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清、微量元素等) 3、温度和PH 温度36.5+0.5度,pH7.2~7.4 4、气体环境 O2和CO2(95%空气和5% CO2 ) 1. 概念:将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育成动物个体。 五、体细胞核移植技术存在的问题 胚胎移植-动物幼体产出 概率<10% 克隆动物存在着健康问题 克隆动物的食品安全性问题存在争议 2.2 动物细胞工程 【高考再现2】以下为植物体细胞杂交技术流程图,其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞,所含有的染色体组分别是AA和BB。 (1)①过程发生的化学变化是____________________________。 (2)将若干a和b等量混合后转移到培养基上培养,再经过②和③,c细胞类型有________________________(不考虑三个或以上细胞融合) (3)在采用化学法进行过程②时,一般是用_______________作为诱导剂。 (4)植物体细胞杂交与自然状况下的生殖细胞杂交相比,前者的主要意义是_______________________________________________。 纤维素和果胶发生水解 AA、BB、AAAA、BBBB、AABB 聚乙二醇(PEG) 克服不同生物远缘杂交的障碍 优点: 克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍,出现自然界没有的新品种。 尚未让杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性状。 未解决问题: 植物组织培养 植物体细胞杂交 1.动物细胞培养 2.动物细胞融合 3.单克隆抗体 4. 核移植 回顾: 动物细胞工程常用的技术手段: 植物细胞工程常用的技术手段有哪些? 就是从动物机体中取出相关组织,将它分散成单细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。 1、动物细胞培养的应用和概念: 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 胰蛋白酶 剪碎 单个细胞 加培养液 制成 细胞悬浮液 10代 细胞 部分细胞“癌变”,无限传代 动物细胞培养不能 最终培养成动物体 50代细胞 原代培养 传代培养 细胞贴壁 剥离、分瓶 细胞株 细胞 细胞系 2.动物细胞培养过程: 增殖能力强,分裂旺盛,分化程度低,容易培养 去掉组织间 蛋白 动物细胞培养特点: 贴壁生长、接触抑制: 4、动物细胞培养条件 保证细胞顺利的生长增殖 离体培养的细胞对微生物和有毒物质没有防御能力 能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶? 核移植 (难度高) 受体细胞:MⅡ期的卵母细胞 三、动物体细胞核移植技术 胚胎细胞核移植: 体细胞核移植: 细胞分化程度低,恢复全能性容易 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 卵母细胞 黑面母绵羊 白面母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 2.体细胞核移植过程 融合后的卵母细胞 电脉冲刺激 供体细胞(供核) 细胞培养 体细胞 卵巢卵母细胞(MⅡ中期:供质) 去核 无核卵母细胞 注入 细胞融合 重组细胞 构建重组胚胎 胚胎移植 代孕母体 生出与供体奶牛遗传基础相同的犊牛 归纳: 1.共分成两大阶段:核移植和胚胎移植 2.取卵母细胞作受体细胞的原因是:它是最大的细胞,易操作;含有激发细胞核全能性的物质 3.严格来说新个体有卵母细胞的细胞质所以有两个亲本的性状 2.体细胞核移植过程 (MⅡ卵母细胞) 减数第二次分裂中期 去核的卵母细胞 供体细胞注入去核卵母细胞 受体细胞激活,完成分裂、发育 胚胎移植 四、体细胞核移植技术的应用前景 1、加速家畜遗传改良进程,促进优良畜群繁育 2、保护濒危物种,增加存活数量 3、克隆动物作为生物反应器,生产医用蛋白 4、可以作为异种移植的供体,可以用于组织器官的移植 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 1.概念:指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
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