(编号267)植物组织培养.ppt

（二）植物组织培养的分类 1、根据培养的器官不同，分为花药培养、胚珠培养、根培养、茎尖培养、叶培养等； 2、根据培养基的形态（培养方式），分为固体培养（在培养基内加入琼脂）和液体培养（也叫液体震荡培养或悬浮培养）2 种 3、根据培养物量的多少，分为大量培养、微量培养； 4、根据培养过程是否需要光照，分为光培养、暗培养； 5、根据培养方法不同，分为平板培养、微室培养、悬浮培养、单细胞培养等。 3、再分化 愈伤组织在一定条件下，又可产生分化现象，再度形成另一种或几种类型细胞、组织器官的过程。 3、培养基的配制方法 将母液按顺序放入烧杯 加入生长调节物质 加琼脂 加糖 定容 熔化琼脂 调整pH 培养基分装到培养瓶中 加盖贴标签（注明培养基的名称与配制时间） 4、培养基的灭菌 条件：压力：108 kPa 温度：121 ℃ 时间：15 ~ 20 min 作物生产技术专业 / 教学资源库 《植物与植物生理》第五单元 《植物与植物生理》第五单元教学子单元2：微课件5 植物组织培养 汇报人：韩春梅 学习目标 掌握植物组织培养的原理； 了解植物组织培养的方法； 掌握植物组织培养在农业上的应用。 主要内容 植物组织培养的原理 植物组织培养的基本概念 植物组织培养的分类 植物组织培养的类型 植物组织培养的原理 植物组织培养的方法 植物组织培养的应用 重点和难点 重点 植物组织培养在农业上的应用 难点 植物组织培养的原理 一、植物组织培养的原理 （一）植物组织培养的基本概念 1、植物组织培养：指在无菌培养条件下将离体的植物器官、组织或细胞进行培养，最后形成完整植株的技术。 2、外植体：通常把被培养的离体植物细胞、组织或器官等统称为外植体。 补充：悬浮培养又分为振荡培养、旋转培养和纸桥培养 振荡培养：在培养过程中，将培养基和被培养器官、组织、细胞放入振荡器中振荡而完成的培养过程。主要应用于组织培养和细胞培养。 旋转培养：在培养过程中，将培养基和被培养器官、组织、细胞放入摇床旋转而完成的培养过程。主要应用于器官脱分化培养。 纸桥培养：在培养过程中，将培养基中放入滤纸，再将材料置于滤纸上而进行的培养过程。主要应用于植物脱毒茎尖培养。 （三）植物组织培养的类型 1、愈伤组织培养 愈伤组织（外植体） 体细胞胚胎发生（体细胞胚） 再生植株 愈伤组织（外植体） 器官发生途径（不定根/芽） 再生植株 2、器官培养 根、茎、叶、花、果实、种子等均可 3、胚培养 拯救胚：避免受精后胚乳发育不良或因种胚与胚乳间不亲和而致使杂种胚夭折，及时分离幼胚接种在无激素培养基上使之直接成苗。 4、细胞和原生质体培养 在组织培养过程中，对单个分离出来的细胞或去掉细胞壁而裸露的原生质体进行培养。 （四）植物组织培养的原理 1、理论基础 植物细胞全能性：指植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有发育成为完整植株的潜在能力，细胞的这种特性叫细胞全能性。 2、脱分化 将已经分化的细胞或组织逐渐恢复到分生状态形成愈伤组织的过程。 愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间以后，通过细胞分裂，形成一种高度液泡化、无定形状态、由薄壁细胞组成的排列疏松的组织。 再分化 脱分化 愈伤组织 外植体 试管苗 新植株 CTK、IAA 培养基 植物组织培养过程（无菌环境下操作） 二、植物组织培养的方法 （一）培养基的成分 1、无机营养物：大量和微量元素 2、碳源：蔗糖—作碳源和能源，维持渗透压 3、维生素： B1、B6 、烟酸、肌醇等 4、有机附加物：氨基酸、番茄汁等，利于愈伤组织的诱导 5、生长调节物质：生长素、赤霉素等 6、活性炭（吸附有毒有害物质） （二）培养基的配制 1、母液的配制 一般将母液分成大量元素、微量元素、Fe盐、维生素、氨基酸等母液；植物生长调节物质也可单独配制成母液，一般浓度为0.5 ~ 1 mg/ml； 2、母液的保存 一般将母液保存在0 ~ 5 ℃ 的冰箱内保存（分别在母液瓶上贴上标签）。 高 压 蒸 汽 灭 菌 锅 （三）外植体的接种—无菌操作 是将表面灭菌的植物材料切碎或分离出器官、组织、细胞转放到无菌培养基上的全部过程。整个接种过程需无菌操作。 （四）植物组织培养的条件 1、光照