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（三）植物组织培养的操作过程 （四）植物组织培养的概念： 1、微型繁殖 病毒在作物体内逐年积累，会导致作物产量降低，品质变差 分生区附近（茎尖、根尖）的病毒极少，甚至没有 利用组织培养时，分裂状态的细胞易受培养条件和外界压力（如射线，化学物质等）的影响而产生突变的原理，诱导并筛选出对人类有用的突变体。 植物组织培养的培养基 * 专题2 细胞工程 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 什么叫细胞工程 2.1植物细胞工程 一、植物组织培养 （一）原理： 细胞的全能性 细胞的全能性 1.概念: 已高度分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能。 2.原因： 生物体细胞含有本物种所特有的全套遗传信息， 都有发育成为完整个体所必需的全部基因。 3.全能性大小： ①受精卵＞胚胎干细胞＞生殖细胞＞体细胞 ②植物细胞＞动物细胞 思考讨论： 为什么体内细胞没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织、器官？ 基因在特定空间和时间条件下选择性表达的结果。在个体发育的不同时期，生物体不同部位的细胞表达的基因是不同的，合成的蛋白质也不一样，从而形成了不同的组织和器官。 （二）植物组织培养的几个概念 从活植物体上切下进行培养的那部分组织或器官 外植体： 愈伤组织： 离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间以后，通过细胞分裂，形成一种高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松无规则的组织。 植物细胞的脱分化： 已分化的细胞经过诱导后，失去了原有的结构和功能又重新恢复了分裂功能的过程，又称去分化。 脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化出根或芽等器官的过程。 植物细胞的再分化： 1）外植体灭菌消毒（根尖、茎、芽、嫩叶、种子、花粉等） 2）用消毒过的器械将外植体置于培养皿中 3）切取所需的外植体 4）将外植体接种于培养容器的培养基上 整个实验在超净工作台上进行，保持无菌！ 外植体经过一段时间在培养基上生长后，会形成愈伤组织。 切取 接种 愈伤组织的形成 试管苗的形成 培养室 移栽 在_____和_________的条件下将___的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予一定的培养条件，诱导产生___________、_________，最终形成完整的植株。 无菌 人工控制 愈伤组织 丛芽 离体 1、定义： 将两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，且把杂种细胞培育成新的植物体的过程。 2、优势：（与有性杂交方法比较） 克服了远缘杂交不亲和的障碍，拓展了可用于杂交的亲本组合范围。 二、植物体细胞杂交技术 未能让杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良。 3、未解决的问题： 细胞融合的基础： 细胞膜的流动性 化学法： 聚乙二醇（PEG） 物理法： 离心、振动、电激等 （2）人工诱导细胞原生质体融合： 酶解法——纤维素酶和果胶酶 （1）去除细胞壁： 4、基本技术： (1) (1) (2) (3) (4) (5) 5、植物体细胞杂交过程示意图 标志 去壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂种细胞 细胞分裂 愈伤组织 杂种植株 再生壁 为什么“番茄—马铃薯”超级杂种植株没有如科学家所想像的那样，地上长番茄、地下结马铃薯？ 主要原因是：生物基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控、相互影响的，所以马铃薯—番茄杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质，但这些遗传物质的表达受到相互干扰，不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达，杂交植株不能地上长番茄、地下结马铃薯就是很自然的了。 （1）概念： 应用组织培养技术，快速繁殖植物（也叫快速繁殖技术） （2）原理： 植物细胞的全能性 （3）优点： 繁殖率高，可大批量生产 取材少 培养周期短 保持优良性状 一、植物繁殖的新途径 切取茎尖进行组织培养获得 2.作物脱毒 (1)材料: (2)脱毒苗: 无病毒的茎尖 3.神奇的人工种子 结构： 优点： 技术： 原理： 人工薄膜+胚状体（不定芽、顶芽、腋芽） 不受气候、季节、地域的限制 保留优良性状 时间短，占地少 植物组织培养 细胞全能性 （二）作物新品种的培育 1、单倍体育种 方法： 花药离体培养 技术： 组织培养获得单倍体 秋水素处理单倍体的幼苗，使染色体加倍 优点： 明显缩短了育种年限 后代稳定遗传 2、突变体的利用 红豆杉与紫杉醇 人参皂甘的生产 （三）细胞产物的工厂化生产 1.种类: 2.技术: 蛋白质,脂肪,糖类,药物,香料,生物碱等. 植物的组织培养. 作业： 请利用体细胞杂交技术尝试设计出白