RNA剪接和加工.pptVIP

三、酵母tRNA的剪接 前面的剪接反应是依赖于一些短的保守序列，转酯反应与连接反应同时进行。在酵母tRNA的剪接过程中，采用了不同的机制，链的断裂与连接是两个独立的反应。 四、 RNA的末端修饰 II 类内含子的结构域（domain）5和6的结构，类似于和核RNA内含子剪接体中U6-U2及U2-内含子配对形成的结构。 II类内含子（group II） (II 类内含子) (核RNA内含子剪接体) 三类内含子剪接模式的比较： 核RNA内含子和II类内含子的剪接很相似； 靠近3’剪接位点的一A的2-OH 攻击内含子5末端，形成索套（lariat）中间体。 都是通过酯基转移反应进行； tRNA 的剪接与成熟 （真核生物） OH 3’ACC 5’ N P 2’ 3’ Kinase + GTP 3’ACC 5’ Endonuclease 环化磷酸二酯酶 CPDase 内切核酸酶 激酶 3’ACC 5’ N P 2’ 3’ P 腺嘌呤合成酶、 Ligase + ATP 3’ACC 5’ N P 2’ 3’ P pP Ligase 3’ACC 5’ N P 2’ 3’ P 2’磷酸转移酶 3’ACC 5’ N 2’ 3’ P （一）mRNA的5端修饰 1、加帽 在磷酸酶的作用下，将5 ′-端的磷酸基水解，然后再加上鸟苷三磷酸，形成GpppN的结构，再对G进行甲基化。 新加的G以反方向与5′连接，这一结构称为帽子（cap）结构 5′ 5′ Gppp + pppApNpNp... ↓ 5′ 5′ GpppApNpNp... + pp + p 2、甲基化 只在末端G的7位甲基化的帽子称为帽子0（cap 0），写作m7GpppX； 若第二个核苷酸2-OH甲基化，则称为帽子1（cap 1），写作m7GpppXm； 若第三个核苷酸2’-OH甲基化，则称为帽子2（cap 2），写作m7GpppXmpYm。 mRNA 3末端的产生 Pol I 和pol III 在特定的位点终止合成 （二）RNA的3末端修饰 Pol II无特定终止位点？ Pol II无特定终止位点，3’-OH末端通过在特定位点切割后加上poly(A)来形成。 末端的AAUAAA序列作为切割和添加poly(A)的位点的信号。 产生正确的末端结构需要核酸内切酶（由CFI和CFII组成）切割RNA； 特异组分（CPSF）识别AAUAAA序列； 激发因子CstF，结合在切割位点下游一富含G-U的序列。 poly(A)聚合酶（PAP）合成poly(A)尾部； * * * * * * * * * * * 第五节 RNA剪接和加工 大多数真核生物编码蛋白质的基因是不连续基因，内含子与编码序列一起被转录。因此mRNA的原初转录产物是分子量很大的前体，分子大小极不均一。这些高分子量、不均一的核内RNA称为核内不均一RNA（heterogeneous nuclear RNA, hnRNA)。 hnRNA 经加工和选择性拼接，产生有功能的成熟的mRNA，释放到细胞质中。 翻译 转录 末端修饰 剪接 RNA剪接、加工均发生于核内 RNA剪接 三类剪接系统: 高等真核生物中，外显子-内含子边界、位于内含子内的短的保守序列，由一复杂的核蛋白组成的剪接器复合体对其识别，并切除内含子。(核RNA剪接） 有两组不同的内含子可发生自我剪接。（自我剪接RNA——Ⅰ类、Ⅱ类自剪接内含子） 酵母核前体tRNA内含子的切除。 除核前体tRNA外，RNA的剪接都通过酯基转移（transesterification）反应切除。 内含子两端没有长的同源或互补序列，但有极短的保守的共有序列，左端（上游）为GT，右端（下游）为AG。这一现象称为GT-AG规则。在RNA中则为GU-AG。 左端的位点也叫供体位点（donor site）或者5，右端也叫受体位点（acceptor site）或者3。 一、 核RNA的剪接 （一）核RNA剪接的模式 原则上5 ′可以和任何3 ′ 位点进行剪接。 剪接位点是通用的； 剪接器无组织特异性。 剪接存在索套（lariat）结构，需三个序列： 5′剪接位点； 3 ′剪接位点； 分支点 剪接的第一步，是内含子5’ 端与上游外显子之间断裂； 5’端与内含子中靠近3’端的一A 残基2’-OH 形成一索套形中间产物; A 所在位点称为分支位点（branc