艾滋病常用实验室检测及临床意义分析.pptVIP

艾滋病常用实验室检测及临床意义分析.ppt

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主要内容 HIV抗体检测 CD4检测 病毒载量检测 实验室安全防护 艾滋病实验室分类 筛查实验室(CD4检测实验室) 确证实验室(CD4、病毒载量实验室…) HIV实验室条件 人员:经过专门技术培训,取得培训合格证/上岗证; 环境:功能分区,符合生物安全二级要求; 仪器设备:按要求配备,满足检测要求。 实验室必须经过资质认证/验收! HIV病原体诊断 HIV抗体检测 艾滋病病毒抗原检测(P24) HIV核酸检测 病毒分离 检测样品 血清、血浆 尿液 抗凝全血(CBC、CD4、VL…) PBMC(外周血淋巴细胞) 艾滋病抗体确证试验 免疫印迹法(WB)为目前最常用的HIV抗体确认方法,被公认为判断HIV感染的黄金方法。 艾滋病抗体检测试剂使用条件 HIV筛查或确认试剂必须是HIV/1+2混合型,国家卫生部批准或注册,经过国家医药监督管理局批批检合格,临床试剂评估优良,并且在有效期内。 检测要点 1、严格按照试剂说明书操作,不得擅自更改。 2、注意防止交叉污染。 3、严格遵守实验室操作规程。 4、认真做好实验记录。 HIV抗体筛查呈阳性的处理 (1)填写HIV抗体筛查阳性送检单 (2)尽可能重新采集受检者的血样。 (3)将二份血样(或仅原血样)连同HIV抗体筛查阳性送检单一并送当地艾滋病筛查中心实验室,再转送艾滋病确认实验室,或直接送确认实验室确认。 (4)筛查中心实验室应尽快进行复测。 (5)做好检测后咨询。 HIV抗体确证结果报告 1、 HIV抗体阳性应出具HIV抗体阳性确认报告,并按相关规定做好咨询、保密和报告工作; 2、HIV抗体阴性应出具HIV抗体阴性确认报告,如果近期有高危行为,如性乱、注射毒品等,或有急性流感样症状等情况,为排除“窗口期”的可能,建议1个月以后再做抗体检测; 抗体确证不确定结果 HIV抗体不确定出具HIV抗体不确定确认报告,在备注中应注明“1个月后复查”。 1、随访:每1个月一次,连续2次,共2个月。 2、做好检测后咨询。 实验室记录要求 1、标本的登记 收到标本后,及时登记有关参数,包括受检者姓名或代号、试管编号、性别、年龄、职业、送检单位、人群类别、检验结果、送检日期、报告日期、备注 ( 必要时记录通信地址 )等。 2、实验原始记录表 应按实验要求,设计操作的原始记录表,标明空白对照、阳性对照、阴性对照、外部对照以及待检样品的位置,便于指导实验人员加样。要注明试剂盒来源、测定方法、批号、有效期、操作人员和复核人员姓名及检测日期。 T淋巴细胞分类 正常人的CD4+T淋巴细胞约占总的T淋巴细胞的65%,CD8+T淋巴细胞约占35%。人体感染了HIV后,涉及的主要病理过程就是免疫系统的损害,主要表现为:CD4+T淋巴细胞的丢失,绝对数量的减少,同时CD8+T淋巴细胞数量增加,CD4和CD8的比例失调。因此CD4+T淋巴细胞计数作为直接测定免疫功能的方法,是提供HIV感染病人免疫系统损害状况最明确的指标。 CD4+T淋巴细胞正常值 CD4:410-1590/mm3 CD8:190-1140/mm3 CD4/CD8:>1  CD4+T淋巴细胞计数意义 是艾滋病疾病分期、确定诊断、制定抗病毒治疗和预防机会性感染方案的标准实验室指标,也是与病毒载量相配合预测疾病进程的可靠指标。 CD4+T淋巴细胞检测意义 1、用于HIV感染者的疾病分期:凡CD4+T淋巴细胞<200/mm3或CD4+T淋巴细胞的百分比<14%的HIV感染者可归入艾滋病。 CD4+T淋巴细胞检测意义 2、判断HIV感染者的临床合并症(各种机会性感染与CD4+T淋巴细胞的相关性),如CD4+T淋巴细胞<200/ mm3时,很容易发生卡氏肺囊虫肺炎;而巨细胞病毒感染和鸟分支杆菌感染常发生于CD4+T淋巴细胞<50/mm3的病人,极少见于CD4+T淋巴细胞>100/mm3的病人。 CD4+T淋巴细胞检测意义 3、 帮助确定抗HIV药物治疗及机会性感染预防性治疗的适应症,例如,当CD4+T淋巴细胞<200/ mm3时,应给予抗卡氏肺囊虫肺炎的预防性治疗;   4、抗HIV药物疗效的重要判断指标。 成人及青少年艾滋病分期标准(美国CDC.1993) CD4+、CD8+T细胞检测绝对计数方法 单平台法: 应用流式细胞仪、绝对计数管及相应软件,可直接得出CD4+、CD8+T细胞值,操作简单,结果准确,目前广泛应用。 多重平台法: 包括白细胞计数、白细胞中的淋巴细胞百分比及淋巴细胞中的CD

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