第八章 酶的作用机制和酶的调节.ppt

第八章 酶的作用机制和酶的调节 一.酶的活性部位(active site) 酶的活性部位 与催化作用相关的结构特点 活性中心：酶分子中直接和底物结合并起催化反应的空间局限（部位）。 结合部位(Binding site)： 酶分子中与底物结合的部位 或区域一般称为结合部位。 （一）酶的活性部位的特点 （1）活性部位在酶分子的总体中只占相当小的部分，通常只占整个酶分子体积的1%-2%。 （2）酶的活性部位是一个三维实体。酶的活性取决于活性中心的构象。 （3）酶的活性部位并不是和底物的形状正好互补，而是在酶和底物结合的过程中，底物分子或酶分子，有时是两者的构象同时发生了一定的变化后才互补的，这是催化基团的位置也正好在所催化底物键断裂和即将生成键的适当位置。 （4）酶的活性部位是位于酶分子表面的一个裂缝内。 （5）底物通过次级键较弱的力结合到酶上。 （6）酶活性部位具有柔性或可运动性。 （二）研究酶活性部位的方法 二．酶催化反应的独特性质 （1）酶反应可分成两类，一类反应仅仅涉及到电子的转移，这类反应的速率或转换数在108 s-1数量级；另一类反应涉及到电子和质子两者或其他基团的转移，它们的速率在103 s-1 。 （2）酶的催化作用是由氨基酸侧链上的功能基团和辅酶为媒介。 （3）酶催化反应的最适pH范围通常是狭小的。 （4）与底物相比，酶分子很大，而活性部位通常只比底物稍大一些。 （5）酶除了具有进行催化反应所必需的活性基团外，还有别的特性。 三.影响酶催化效率的有关因素 多元催化 (multielement catalysis) 酶促反应通常是几个基元反应协同作用的结果，包括酸碱催化、共价催化、金属离子催化等。 表面效应 (surface effect) 酶的活性中心形成疏水性口袋，防止水分子干扰酶与底物的结合。 (1)临近定向效应 在酶促反应中，底物分子结合到酶的活性中心，一方面底物在酶活性中心的有效浓度大大增加，另一方面，由于活性中心的立体结构和相关基团的诱导和定向作用，使底物分子中参与反应的基团相互接近，并被严格定向定位，使酶促反应具有高效率和专一性特点。 邻近效应 (proximity effect)与定向排列 (orientation arrange ) 邻近指底物汇聚于酶的活性中心，使酶活性中心的底物浓度高于其它处，定向则指底物的敏感化学键与酶的催化基团正好对准，使反应加速进行。 有利于提高反应速度； 定向效应包括 1)反应物的反应基团之间（双底物反应基团邻近） 2)酶的催化基团和底物反应基团之间 活性中心内定向使反应变成分子内反应 定向效应 (2)“张力”和“形变” 底物与酶结合诱导酶的分子构象变化，变化的酶分子又使底物分子的敏感键产生“张力”甚至“形变” ，从而促使酶－底物中间产物进入过渡态。 诱导契合 (3)酸碱催化 酸-碱催化可分为狭义的酸-碱催化和广义的酸-碱催化。酶参与的酸-碱催化反应一般都是广义的酸－碱催化方式。 广义酸－碱催化是指通过质子酸提供部分质子,或是通过质子碱接受部分质子的作用，达到降低反应活化能的过程。 酶活性部位上的某些基团可以作为良好的质子供体或受体对底物进行酸碱催化。 His 残基的咪唑基是酶的酸碱催化作用中最活泼的一个催化功能团。 酸碱催化 (4)共价催化 共价催化 （5）离子催化 酶的催化实例—溶菌酶 丝氨酸蛋白酶族 消化作用的丝氨酸蛋白酶 天冬氨酸蛋白酶族 酶活性的调节 （1）天冬氨酸转氨甲酰酶（ATCase） 天冬氨酸转氨甲酰酶（ATCase） （2）3-磷酸甘油醛脱氢酶 酶活性的调节控制--别构调节 酶活性的调节控制--别构调节 酶活性的调节控制--别构调节 生理意义 别构效应的机制--齐变模型（MWC）  别构效应的机制--序变模型（KNF）  （二） 反馈调节 酶活性的调节控制—酶原激活 某些酶原的激活过程 酶活性的调节控制—酶原激活 胃蛋白酶原的激活 胰蛋白酶原的激活 常见类型 酶活性的调节控制-共价修饰 酶活性的调节控制-共价修饰 蛋白激酶 同工酶—概述 同工酶—乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH) 例：乳酸脱氢酶(LDH1～ LDH5) 同工酶的生物学功能 同工酶作为遗传标志 同工酶和个体发育及组织分化密切相关 分化型同工酶（differentiation）或成年性同工酶（adult type isozyme） 原始性同工酶（original type isozyme ）或胎儿性同工酶（foetal type isozyme ） 同工酶与代谢调节 体内存在同工酶的意义在于适应不同组织或不同细胞器代谢上的不同需要 同工酶与癌基因的表达 在农业上